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FISH 濾光片和濾光片組

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更新時間：2024-02-16 15:42:10瀏覽次數(shù)：131次

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產(chǎn)品簡介

熒光原位雜交(FluorescenceInSituHybridization,FISH)是指利用熒光染料標(biāo)記的，已知序列的單鏈核酸作為探針，通過堿基互補(bǔ)配對原則，與待檢樣品中核酸進(jìn)行特異性結(jié)合，然后通過觀察熒光信號，從而對樣品中待檢核酸進(jìn)行定性，定量及定位分析

詳細(xì)介紹

熒光原位雜交 (Fluorescence In Situ Hybridization, FISH) 是指利用熒光染料標(biāo)記的，已知序列的單鏈核酸作為探針，通過堿基互補(bǔ)配對原則，與待檢樣品中核酸進(jìn)行特異性結(jié)合，然后通過觀察熒光信號，從而對樣品中待檢核酸進(jìn)行定性，定量及定位分析。FISH 具有快速，信號強(qiáng)，特異性高以及可以多重染色等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于產(chǎn)前診斷，基因組結(jié)構(gòu)分析等領(lǐng)域。

影響 FISH 結(jié)果的因素有很多，包括樣品準(zhǔn)備和處理，顯微鏡，光源，熒光探針以及。FISH 通?；跓晒怙@微鏡來觀測信號，所用包括激發(fā)片，和發(fā)射片三種。其工作原理如下圖所示：



激發(fā)片: 選擇透過光源的某部分波段的光，用來激發(fā)熒光探針；


二向色鏡: 反射光源的光至樣品，透過產(chǎn)生的熒光并反射激發(fā)光的散射光；


發(fā)射片: 選擇透過熒光的某部分波段的光至檢 測器或人眼，并阻擋掉激發(fā)光的雜散光。 



在 FISH 實(shí)驗(yàn)中，濾光片帶寬的大小會對 FISH 圖像的對比度產(chǎn)生重要的影響。增加帶寬會提高激發(fā)和接收效率，使接收的信號增強(qiáng)。但實(shí)際接收的信號中同時包含了探針的熒光信號和樣品的背底噪音，帶寬的增加會同時增加這兩者的強(qiáng)度。帶寬減小，雖然可以降低背底噪音的強(qiáng)度，但熒光信號也會隨之減弱 。所以對于對比度要求很高的 FISH 實(shí)驗(yàn)，針對于每種具體的染料，都會存在一個的帶寬，使 FISH 圖像能夠達(dá)到的對比度。的FISH 濾光片的帶寬都是根據(jù)常用的 FISH 染料做過優(yōu)化，可以為用戶的 FISH 實(shí)驗(yàn)提供的對比度的圖像。



       FISH 實(shí)驗(yàn)中的噪音主要來自三個方面：

      (1) 細(xì)胞或組織的自發(fā)熒光;

      (2) 試劑的自發(fā)熒光;

      (3) 熒光探針的非特異性結(jié)合;







      Chroma FISH 濾光片組具有以下特點(diǎn):

     ·保證足夠亮度的同時，提供的對比度；

     ·消除串色的影響；

       a. 消除 Gold 和 Aqua 串色到 Green 通道；

       b. 消除 Gold 和 Orange 串色到 Red 通道；

     ·對多波段濾光片組中的 DAPI 通道進(jìn)行特殊處理，避免 DAPI 信號過強(qiáng)而將其他信號掩蓋；

     ·多色圖像疊加零漂移；

     ·磁控濺射鍍膜，終身質(zhì)保。


FISH 單波段帶通濾光片組：

濾光片組

激發(fā)片

CWL/FWHM

發(fā)射片

CWL/FWHM

二向色鏡

50% cut-on

 FISH 探針

49000

350/50

460/50

400

DAPI

49028

395/25

460/50

425

DAPI

**用于395nm 光源

49301

405/10

460/36

425

Spectrum Blue/ZyBlue

49302

436/20

480/30

455

Spectrum Aqua

49303

495/25

537/29

515

Spectrum Green/ZyGreen

 **用于有Aqua，無 Gold 時

49308

485/25

525/30

505

Spectrum Green/ZyGreen

**用于無 Aqua，有 Gold 時

49312

490/20

525/20

505

Spectrum Green/ZyGreen

**用于有 Aqua，有 Gold 時

49304

546/10

572/23

556

SpectrumGold/ZyGold

49305

546/22

590/33

565

Spectrum Orange/ZyOange

**用于無 Red 時

49309

539/21

576/31

556

Spectrum Orange/ZyOange

**用于有 Red 時

49306

580/25

625/30

600

Spectrum Red/ZyRed 

**用于無 Gold，無 Orange 時

49310

592/21

630/30

610

Spectrum Red/ZyRed 

**用于有 Gold，無 Orange 時

49311

599/13

632/28

612

Spectrum Red/ZyRed 

**用于有 Orange 時

49307

630/20

667/30

647

Spectrum Far Red

49009

640/30

690/50

660

Spectrum Far Red


FISH 雙波段帶通濾光片組：

濾光片組

激發(fā)片

CWL/FWHM

發(fā)射片

CWL/FWHM

二向色鏡

50% cut-on

FISH 探針

探針1

探針2

59001v2

Multi Band 

394/30 

483/26

Multi Band 

443/36 

527/40

Multi Band 

420 

502

DAPI

Green

59002v2

Multi Band 

394/30 

544/30

Multi Band 

462/35 

590/41

Multi Band 

430 

566

DAPI

Orange

59003v2

 Multi Band 

394/30

576/30

Multi Band 

462/35 

627/50

Multi Band 

442 

600

DAPI

Red

59010

Multi Band 

490/20

585/22

Multi Band 

526/25 

628/34

Multi Band 

508 

605

Green

Red

59011

Multi Band 

480/30 

560/25

Multi Band 

521/34 

606/40

Multi Band 

503 

585

Green

Orange

59012

Multi Band 

475/60 

552/24

Multi Band 

515/30 

597/46

Multi Band 

495 

570

Green

Orange

59033

Multi Band 

436/20 

535/25

Multi Band 

480/23 

580/30

Multi Band 

462 

558

Aqua

Gold


FISH 三波段帶通濾光片組：

濾光片組

激發(fā)片

CWL/FWHM

發(fā)射片

CWL/FWHM

二向色鏡

50%cut-on

FISH 探針

探針1

探針2

探針3

69008

Multi Band 

435/22 

501/20 

575/24

Multi Band 

469/25 

536/29 

635/69

Multi Band 

453 

517 

595

Aqua

Green

Red

69011

Multi Band 

434/21 

498/20 

566/28

Multi Band 

468/22 

530/25 

610/40

Multi Band 

453 

514 

588

Aqua

Green

Orange

69013v2

Multi Band 

395/25 

480/30 

560/25

Multi Band 

440/31 

520/35 

605/41

Multi Band 

420 

504 

585

DAPI

Green

Orange

89084v2

 

Multi Band Ex1

480/30

560/25

 

Multi Band

440/31

520/35

605/41

 

Multi Band

420

504

585

 


Green

Orange

Multi Bａnd Ex2

395/25

480/30

560/25

 

DAPI

Green

Orange

Singe Band

395/25

480/30

560/25

 

DAPI

Green

Orange

69015

 

Multi Band

395/25

490/20

585/22

 

Multi Band

450/30

525/25

627/34

 

Multi Band

419

508

605

 

DAPI

Green

Red

89085

 

Multi Bａnd Ex1

490/20

585/22

 

Multi Band

450/30

525/25

627/34

 

Multi Band

419

508

605

 


Green

Red

Multi Bａnd Ex2

395/25

490/20

585/22

 


Green

Red

Single Band

395/25

490/20

585/22

 

DAPI


Red


FISH 三波段帶通濾光片組：


濾光片組

激發(fā)片

CWL/FWHM

發(fā)射片

CWL/FWHM

二向色鏡

50% cut-on

FISH 探針

探針1

探針2

探針3

探針4

69014

Multi Band 

387/10 

432/25 

498/20 

566/28

Multi Band 

468/22 

530/25 

610/40

Multi Band 

453 

514 

588

DAPI

Aqua

Green

Orange


關(guān)鍵詞：顯微鏡 熒光顯微鏡

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