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目錄:山東風(fēng)途物聯(lián)網(wǎng)科技有限公司>>非洲豬瘟檢測儀>>非洲豬瘟試劑盒>> FT-ZWSJ非洲豬瘟檢測試劑盒

非洲豬瘟檢測試劑盒
  • 非洲豬瘟檢測試劑盒
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  • 非洲豬瘟檢測試劑盒
參考價 2000
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
2000
≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 風(fēng)途物聯(lián)網(wǎng)
  • 型號 FT-ZWSJ
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 濰坊市
屬性

儀器種類:非洲豬瘟檢測試劑盒

>

更新時間:2024-07-12 16:36:00瀏覽次數(shù):1348評價

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儀器種類 非洲豬瘟檢測試劑盒
非洲豬瘟檢測試劑盒可用于血液、脾臟、肝臟、淋巴結(jié)、 樣品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測

  【獸藥名稱】

  通用名稱:非洲豬瘟檢測試劑盒

  漢語拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe

  英文名稱:African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit 商品名稱:無

  非洲豬瘟檢測試劑盒【主要成分與含量】試劑盒中含有如下組分:

試劑盒組分

含量

陽性對照

250μL/管×1管

 

陰性對照

250μL/管×1管

 

PCR反應(yīng)液

850μL/管×1管

 

萌混合液

150μL/管×1管

 

說明書

1份/盒

【作用與用途】 本試劑盒可用于血液、脾臟、肝臟、淋巴結(jié)、 樣品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。

扁桃體、腎臟、肌肉、環(huán)境樣品等

  【用法與判定】

  1 用法

  1.1待檢樣品釆集、保存及運輸

  1.1.1樣品釆集

  (1) 活豬樣品 無菌采集抗凝血或血清5mL

  (2) 病死豬剖檢樣品或屠宰場剖檢樣品 無菌采集死豬的牌、肺、腎、扁桃體、淋巴結(jié)、肌 肉等組織樣品。2?8°C低溫運至實驗室用于檢測。

  (3) 病豬污染的周邊環(huán)境 采集與病豬相關(guān)場所的糞便、飼料、污水樣品。2?8C低溫運至 實驗室用于檢測。

  1.1.2樣品保存 采集的樣品在2?8°C保存應(yīng)不超過24小時,-70°C條件下保存,避免反復(fù)凍 融。

  1.1.3樣品運輸泡沫箱加冰袋后密封進行運輸。包裝和運輸應(yīng)符合《高致病性動 物病原微生物菌(毒)種或者樣品運輸包裝規(guī)范》和關(guān)于危險品運輸管理的有關(guān)規(guī)定。

<strong>非洲豬瘟檢測試劑盒</strong>

  1.2樣品處理

  1.2.1血液樣品處理 抗凝血樣品置于離心管中,8000 r/min離心2分鐘取上層血漿,編號待 檢。非抗凝血樣品置于離心管中,待凝固后,8000 r/min離心2分鐘取200μL上層血清,編號待檢。

  1.2.2組織樣品處理取適量脾臟、肝臟、淋巴結(jié)、扁桃體、肌肉等組織,置于研磨器或研磨 管中研磨,再加適量生理鹽水混勻,制成約10%的組織勻漿,8000 r/miii離心2分鐘,取200μL上 清于RNase/DNase-free無菌離心管中,編號備用。

  1.2.3環(huán)境樣品處理

  1.2.3.1糞便、飼料樣品處理方法取適量的糞便、飼料放入盛有PBS緩沖液的研磨管中研磨 混勻,制成約10%的勻漿液.8000 r/min離心2分鐘,取200μL上清于RNase^DNase-free無菌離心 管中,編號備用。

  1.2.3.2污水樣品處理方法 直接取200μL污水進行核酸提取。

  1.3病毒核酸的提取用磁珠法或柱式法進行DNA核酸提取。

  1.4熒光PCR反應(yīng):

  1.4.1從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液、酶混合液,室溫融化后,2000 r/min離心5秒。設(shè)被 檢樣品、陽性對照和陰性對照總和為n,則反應(yīng)體系配制如下:

  試劑 體系

  PCR 反應(yīng)液 17× (n+1) μL

  酶混合液 3× (n+1) μL

  1.4.2在新的RNase/DNase-fire 1.5 ml離心管中加入上述試劑,充分混勻后瞬時離心。按照20μL/ 管分裝量將試劑分裝至熒光PCR反應(yīng)管。

  1.4.3在上述制備好的熒光PCR反應(yīng)管中分別加入陰性對照、陽性對照各5μL、處理好的待測 核酸各5μL,終體積25μL/管,蓋好熒光PCR反應(yīng)管蓋,混勻后瞬時離心,轉(zhuǎn)移到熒光PCR儀器 上。

  144將PCR反應(yīng)管放置在熒光PCR儀樣品槽中,在熒光PCR儀上運行以下程序:

步驟

條件

循環(huán)數(shù)

UNG處理

50 ℃, 2分鐘

1

預(yù)變性

95 ℃, 3分鐘

1

預(yù)擴增

95 ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒

 

5

PCR擴増

95 ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒

 

40

  熒光通道選擇FAM,在PCR擴增階段每個循環(huán)的55C時采集熒光信號。設(shè)置擴增體系為25卩I, 同時要選擇passive reference和quencher為none的模式。(注:若熒光PCR儀(如AB17500)按說明 書中的反應(yīng)程序設(shè)置后因持溫時間短無法運行,可將預(yù)擴增和PCR擴增條件變更為95C: 5秒 55°C: 30 秒)

  2結(jié)果判定

  2.1試驗有效性判定

  陽性對照有典型擴增曲線且Ct值W30.且陰性對照無Cl值或無擴增曲線,線形為直線或輕微 斜線,無指數(shù)增。則判試驗結(jié)果有效。否則,此次試驗視為無效。

  2.2樣品判定

  2.2.1陽性:樣本檢測結(jié)果Ct值W35且有明顯指數(shù)增,判定檢出非洲豬瘟病毒核酸。

  2.2.2可疑:樣本檢測結(jié)果Ct值在35?38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對樣本進行重復(fù)檢測,如果重復(fù)實驗 結(jié)果Ct值仍在35?38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增.則判定為陽性,否則為陰性。

  2.2.3陰性:樣本檢測結(jié)果Ct值>38或無Cl值,判定未檢出非洲豬瘟病毒核酸。

  【注意事項】(1)實驗前請仔細閱讀本試劑盒說明書,嚴格按照操作步驟執(zhí)行,在操作過 程中對時間、試劑體積等精確控制可以獲得好的結(jié)果。

  (2) 實驗室應(yīng)嚴格按照有關(guān)規(guī)定分區(qū)管理,依照配液區(qū)-模板提取區(qū)-擴增區(qū)-分析區(qū)順序 進行基因檢測。各區(qū)間人員、器材、試劑及空氣流向應(yīng)有嚴格要求。

  (3) 核酸提取有關(guān)耗村確保潔凈、無DNase/RNase,提取過程盡量低溫、快速,完成后進入 下一步實驗或凍保。

  (4) 對于頂部采光儀器要帶新的一次性PE手套對熒光PCR管封蓋,對于底部采光儀

  器要避免徒手或使用過的手套接觸熒光PCR管底,檢測過程中使用不帶熒光物質(zhì)一次性乳膠手套。

  (5) 凍存試劑使用前應(yīng)于室溫下*融化,瞬時離心使液體*沉于管底。避免反復(fù)凍融, 以免影響試劑性能。

  (6) 樣品、陽性對照等在使用后及時封蓋,.避免組分間及氣溶膠等的污染造成假陽性。

  (7) 擴增產(chǎn)物禁止開蓋,實驗產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)及時收集,遠離PCR實驗室進行無害化處理。 【規(guī)格】50頭份/盒

  【貯藏與有效期】試劑盒置-20°C以下避光保存,有效期12個月。

  【批準文號】獸藥生字163668871

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