蛋白激酶G(PKG),又稱為cGMP依賴性蛋白激酶,是一種由cGMP激活的Serine/Threonine特異性蛋白激酶。
功能與特性
激活機(jī)制:PKG是第二信使分子cGMP的主要受體之一。當(dāng)cGMP與PKG的調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域結(jié)合時(shí),會(huì)引起構(gòu)象變化,從而釋放N末端結(jié)構(gòu)域?qū)Υ呋诵牡囊种?,允許底物蛋白中的Serine/Threonine殘基磷酸化。
生物活性:
平滑肌松弛:PKG在平滑肌組織中促進(jìn)鈣激活鉀通道的開放,導(dǎo)致細(xì)胞超極化和松弛,并阻斷磷脂酶C的激動(dòng)劑活性,減少三磷酸肌醇釋放儲(chǔ)存的鈣離子。
細(xì)胞增殖與凋亡:在許多(但不是全部)細(xì)胞類型中,激活的PKG會(huì)抑制細(xì)胞增殖和/或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
其他功能:PKG還參與血小板功能、精子代謝、細(xì)胞分裂和核酸合成的調(diào)節(jié)。
基因與表達(dá):已在哺乳動(dòng)物中鑒定出兩種PKG基因,編碼PKG I型(PKG-I)和II型(PKG-II)。PKG-I主要位于細(xì)胞質(zhì)中,而PKG-II通過N末端肉豆蔻酰化錨定在質(zhì)膜上。兩者在不同的細(xì)胞類型中表達(dá),具有不同的生物學(xué)作用。
結(jié)構(gòu)特征
PKG的每個(gè)亞基由三個(gè)功能域組成:
N末端結(jié)構(gòu)域:介導(dǎo)同二聚化、抑制激酶活性以及與其他蛋白質(zhì)的相互作用。
調(diào)節(jié)域:包含兩個(gè)不相同的cGMP結(jié)合位點(diǎn),以高親和力和低親和力結(jié)合cGMP。
激酶結(jié)構(gòu)域:催化磷酸鹽從ATP轉(zhuǎn)移至靶蛋白Serine/Threonine側(cè)鏈羥基的反應(yīng)。
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是一種基于抗原與抗體特異性反應(yīng)的檢測方法。它利用抗體能夠特異性地結(jié)合抗原的特性,通過一系列的反應(yīng)步驟,如抗體包被、抗原結(jié)合、酶標(biāo)抗體反應(yīng)和底物顯色等,實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)抗原或抗體的定量檢測。ELISA具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡便等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中。