開花植物的有性受精產(chǎn)物（種子、谷物、水果等）提供了世界上大部分的食物和飼料供應(yīng)。成功受精很大程度上取決于雄配子體的活性。

在自然條件下，大多數(shù)植物的花粉從花藥散出后只能存活幾小時或幾天?；ㄆ诓挥鼋o雜交工作造成困難，有的樹木和園林植物可通過延長花期解決，有的不得不進行花粉儲藏。

花粉冷凍保存是常見存儲方法，可以在較小的空間內(nèi)保存花粉，甚至是稀有和瀕臨滅絕的物種，并且可以根據(jù)需求將最佳花粉負載應(yīng)用到柱頭上。

花粉冷凍保存過程通常包括一系列脫水、冷卻、儲存、解凍和再水化，可能會嚴重影響花粉質(zhì)量，特別是在工藝條件不理想的情況下。因此，業(yè)界采用花粉活力測試作為風(fēng)險管理工具，以防止由于授粉成功率不足而導(dǎo)致產(chǎn)量損失；另外確定花粉活力，為評估植物的繁殖潛力以及花粉細胞生物學(xué)基本問題的基礎(chǔ)研究提供了重要質(zhì)控。

原理

TTC（2,3,5 - 三苯基氯化四氮唑）是一種氧化還原染料。具有活力的花粉在呼吸作用過程中會產(chǎn)生還原物質(zhì)，這些還原物質(zhì)能將無色的 TTC 還原成紅色的三苯甲臜。根據(jù)花粉被染成紅色的程度，可以判斷花粉的活力。有活力的花粉會被染成紅色，活力越高，顏色越深；而無活力的花粉則不會被染色或染色較淺。

操作步驟

花粉采集：選取發(fā)育良好、即將開放的花朵，用鑷子或毛筆輕輕收集花粉，盡量避免混入雜質(zhì)。

花粉預(yù)處理：將采集到的花粉放入離心管中，加入適量的洗滌液，輕輕振蕩或攪拌，然后離心（一般轉(zhuǎn)速為 1000 - 2000 轉(zhuǎn) / 分鐘，離心時間為 3 - 5 分鐘），棄去上清液，重復(fù)洗滌 2 - 3 次，以去除花粉表面的雜質(zhì)。

染色：向經(jīng)過預(yù)處理的花粉中加入適量的 TTC 溶液和緩沖液，使花粉充分懸浮在溶液中。一般 TTC 溶液與緩沖液的體積比為 1:1 或根據(jù)試劑盒說明書進行配制。將混合液在黑暗條件下室溫孵育 15 - 30 分鐘，讓 TTC 與花粉充分反應(yīng)。

觀察與計數(shù)：孵育結(jié)束后，取一滴染色后的花粉懸浮液滴在載玻片上，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察花粉的染色情況?？梢赃x擇多個視野進行觀察，并統(tǒng)計被染成紅色的花粉數(shù)量和未被染色的花粉數(shù)量，計算花粉活力百分比?；ǚ刍盍Γ?）=（紅色花粉數(shù) / 總花粉數(shù)）×100%。