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關(guān)于病原微生物檢測你有什么想了解的呢?

閱讀:1233      發(fā)布時間:2022-9-26
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  近年來發(fā)展起來的在微生物檢測領(lǐng)域中一種新技術(shù)。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯(lián)到磁珠微球上,通過抗原抗體反應形成磁珠一目標病原體復合物或磁珠一一抗一目標病原體復合物,在外部磁場磁力的作用下,將目標病原體分離出來。目前已經(jīng)開發(fā)出了針對各種病原體的免疫磁珠,如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團菌等,廣泛應用到各級科研和實驗室。經(jīng)IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測,檢測時間縮短至4h。IM—Bs還可以和其它檢測技術(shù)聯(lián)合來檢測病原菌,免疫磁珠分離得到的目標菌可繼續(xù)用于分離培養(yǎng)使大腸埃希菌0157低檢測限由200cfu·g提高到2cfu·g~;IMBS結(jié)合聚合酶鏈反應(IMBS—PCR)可對培養(yǎng)條件比較特殊的細菌如苛養(yǎng)菌、厭氧菌進行快速檢測,肉類中的產(chǎn)毒素型產(chǎn)氣莢膜梭菌經(jīng)IMBS.PCR檢測,檢測時間縮短到10h,低檢測限可達10cfu·g~,有研究者利用IMBS結(jié)合實時熒光定量PCR(IMBS—RT—PCR)成功檢測出了水中的輪狀病毒和草莓的諾如病毒,檢測時間大大縮短;Leon—Velarde等利用IMB8結(jié)合酶聯(lián)檢測,大大提高了沙門菌的檢測效率。
  病原微生物是指可以侵人體,在宿主中生長繁殖、釋放毒性物質(zhì)等引起機體不同程度病理變化、發(fā)生感染的微生物,包括細菌、病毒、真菌、寄生蟲、衣原體、支原體等。病原微生物檢測并非新領(lǐng)域,基于病原學證據(jù)的抗感染一直都是臨床診療的'金標準'。如果能盡早識別致病病原、啟動恰當?shù)目垢腥痉桨缚筛纳苹颊哳A后,尤其是重癥感染者。病原微生物檢測在感染判定中意義重大,越來越多的檢測技術(shù)引入臨床,除了傳統(tǒng)的檢測方法如涂片染色、培養(yǎng)分離、免疫學技術(shù)、核酸檢測等,還有二代測序技術(shù)(Next-generationsequencing,NGS)等。
  病原微生物檢測的生物化學方法:
  原理:生化方法檢測病原微生物實際上是測測定微生物特異性酶。由于各種微生物所具有的系統(tǒng)不*相同,對許多物質(zhì)的分解能力亦不一致。因此可利用不同底物產(chǎn)生的不同代謝產(chǎn)物來間接檢測該微生物內(nèi)酶的有無,從而達到檢測特定微生物的目的。
  辛酯酶法:快速檢測沙門氏菌。沙門氏茵能產(chǎn)生辛酯酶,這一性能是除沙門氏菌外的各屬腸杄茵科細茵所不具備的。以4-甲基傘形酮辛酯ハUCAP)為底物,經(jīng)沙門氏菌的辛酯酶降解后,釋放出4-甲基傘形酮(MU),在紫外燈下觀察其發(fā)出的藍色熒光。

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