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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>光合作用系列>> 吲哚乙酸氧化酶測試盒可見分光光度法

吲哚乙酸氧化酶測試盒可見分光光度法
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參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
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更新時間:2023-12-23 21:33:51瀏覽次數:719評價

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貨號 BK-01S7021
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商品介紹:

測定意義:

吲哚乙酸(IAA)在吲哚乙酸氧化酶的作用下,被氧化破壞失去活性。植物體內吲哚乙酸氧化酶活力的大小,對調節(jié)體內吲哚乙酸的水平,起著重要的作用,而影響植物的生長。

測定原理:

在無機酸存在情況下,吲哚乙酸能與FeCl3作用,生成紅色螯合物,該物質在530nm處有最大吸收峰,酶活力的大小可以其破壞吲哚乙酸的速度表示之。吲哚乙酸的含量可用比色法測定。

自備儀器和用品:

低溫離心機、水浴鍋、可調節(jié)移液器、可見分光光度計、1.5mL離心管、1mL玻璃比色皿、和蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

吲哚乙酸氧化酶測試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S7021

11.png 

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

改良馬丁瓊脂 Martin Agar Medium ,Medium 250g

1瓶 BxPC-3細胞株 BxPC-3 低溫運輸和保存

1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X,pH7.6  Tris Buffered Saline(TBS),10X,pH7.6  常溫保存

1mL Protein G瓊脂糖 Protein G Agarose 4℃保存

2 ug pTK-Luc pTK-Luc 低溫運輸,-20℃保存

100次 一步離心式石蠟清除劑 Paraffin Erasol 常溫

2 ug pDsRed2-Nuc pDsRed2-Nuc 低溫運輸,-20℃保存

氯化鈉胰蛋白胨稀釋液 NaCl Tryptone Broth 250g

25g 氟化鈉 Sodium Fluoride 室溫保存

50T 乙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

100次  H5N1神經抑制劑鑒定試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

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H1N1 Matrix Protein 1  A型禽毒H1N1蛋白抗體 規(guī)格: 1ml

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ABCG4  ABC膜轉運蛋白抗體 0.1ml

phospho-Cortactin (Tyr466)  磷酸化皮層肌動蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mycobacterium  結核分枝桿菌抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-ROCK2(Thr249)  磷酸化Rho相關蛋白激2抗體 規(guī)格: 0.1ml

KLF4  腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml

AGTRAP  管緊張素Ⅱ受體相關蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

RORB  維甲酸相關孤兒受體β抗體 規(guī)格: 0.2ml

FAM29A/HAUS6  FAM29蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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