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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>其它系列>> 亞鐵氧化酶(HP)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

亞鐵氧化酶(HP)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
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參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時(shí)間:2023-12-24 15:55:59瀏覽次數(shù):557評(píng)價(jià)

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貨號(hào) BK-01S6958
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱:亞鐵氧化酶(HP)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6958

產(chǎn)品分類:其它系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

Hephaestin (HP)作為銅藍(lán)蛋白的同系物,是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白亞鐵氧化酶,HP屬亞鐵氧化酶家族成員,具有亞鐵氧化酶的活性,參與體內(nèi)鐵代謝。HP的表達(dá)可受鐵、銅及鋅等金屬離子的調(diào)節(jié)。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+,在介導(dǎo)鐵的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)中有重要作用。

測(cè)定原理:

HP催化Fe2+氧化為Fe3+,Fe2+ferrozine反應(yīng)顯色,在560 nm下有特征吸光值。通過(guò)測(cè)定Fe2+的減少速率可測(cè)得亞鐵氧化酶的活性。

自備用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

2 ug pLVX-cGFP II pLVX-cGFP II 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

BSSA BSSA Medium 250g

1瓶 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞株 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 低溫運(yùn)輸和保存

Andrade指示劑  100ml

1mg 鈣離子載體 Calcium Ionophore A23187 室溫避光保存

100mL Triton X-100 10%(w/v) Triton X-100 10%(w/v) 常溫保存

5mL 二氯異溶液,10mg/mL Dichloroisocoumarin Solution -20℃保存

2 ug pWPXL pWPXL 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

30次 石蠟包埋組織DNAout FFPE DNAOUT 常溫保存(溶液C需要-20℃保存)

2 ug p334 p334 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

氯化血紅素 hemin 1g

亞鐵氧化酶(HP)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法Morphine(C1F3)  啡單克隆抗體 規(guī)格: 0.2ml

TAPA1/CD81  CD81抗體 規(guī)格: 0.1ml

dUTPase  脫氧三磷酸核苷水解抗體 規(guī)格: 0.1ml

BIN1  橋連整合因子蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

MAG-a/b  髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體 規(guī)格: 0.1ml

TIA1  細(xì)胞毒顆粒相關(guān)蛋白TIA-1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human IgM/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.5mlhuman serum  人清抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1mlTRPM5  瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白5抗體(M亞家族) 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-CENP-A (Ser7)  磷酸化著絲粒蛋白A 規(guī)格: 0.1mlNCX1/SLC8A1  鈉鈣交換蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

C5ORF33  5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框33抗體 規(guī)格: 0.2mlCollagen X  Ⅹ型膠原抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD105/Endoglin  CD105抗體 規(guī)格: 0.1mlNinjurin 1  神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

IRAK2  白介素-1受體相關(guān)激2抗體 規(guī)格: 0.2mlSPTLC2  絲棕櫚酰轉(zhuǎn)移2抗體 規(guī)格: 0.2ml 

 


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