目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>其它系列>> 甜菜堿含量測試盒可見分光光度法
| 貨號 | BK-01S6934 |
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：甜菜堿含量測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
檢測方法：可見分光光度法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6934
產(chǎn)品分類：其它系列
商品介紹：
測定意義: 甜菜堿是一種廣泛分布于動植物及微生物體內(nèi)的季銨型水溶性生物堿，是生物體內(nèi)的氧化產(chǎn)物，可以增強(qiáng)免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤，并可作為甲基供體，參與促進(jìn)動物蛋白質(zhì)和脂肪代謝、增進(jìn)食欲、緩和應(yīng)激、調(diào)節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用，在化工、醫(yī)藥、食品添加劑等領(lǐng)域有較廣泛的應(yīng)用。 測定原理 甜菜堿在強(qiáng)酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生沉淀，沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液，在525nm處有特征吸收峰，測定525nm處的吸光值，可得樣品的甜菜堿含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、甲醇、、鹽酸和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
酪蛋白葡萄糖肉湯 Sabouraud-dextrose Broth 250g
1g 對鈉鹽 p-Nitrophenylphosphate Disodium Salt Hexahydrate（p-NPP） -20℃保存
我妻氏基礎(chǔ) Wagstsuma Agar Base 250g
5 mg JC-10 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
50mL Calcium Chloride Solution（氯化鈣溶液）, 1M Calcium Chloride Solution, 1M 常溫保存
50次 柱式OLIGO回收試劑盒 Column OLIGOBACK 4℃保存
2 ug pGL4.28[luc2CP/minP/Hygro] pGL4.28[luc2CP/minP/Hygro] 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
改良羅氏基礎(chǔ) L-G medium Base,Modified 250g
1瓶 hFOB 1.19細(xì)胞株 hFOB 1.19 低溫運(yùn)輸和保存
胰酪胨大肉湯 Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 10ml/支*20
250mg Pepsin 4℃保存
甜菜堿含量測試盒可見分光光度法Mouse Anti-human IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
FAF1 Fas相關(guān)1因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-PLB(Ser16) 磷酸化心臟磷蛋白抗體 0.1ml
ERCC6L 發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體（乙醇致畸因子） 規(guī)格: 0.2ml
RAD54B DNA修復(fù)和重組蛋白RAD54B抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD45RO CD45RO抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
S100A6BP/CACYBP 鈣周期素結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
BTBD19 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白19抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-ER-beta(ser87) 磷酸化雌激素受體β抗體 規(guī)格: 0.1ml
HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
DBC1/deleted in bladder cancer 1 膀胱缺失基因1 規(guī)格: 0.2ml
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
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