目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒熒光法
| 貨號 | BK-01S6838 |
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特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒熒光法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
檢測方法：熒光法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6838
產(chǎn)品分類：土壤系列
商品介紹：
測定意義: 土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍，分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。 測定原理： 堿性環(huán)境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成和，通過測定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。 自備儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲苯。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
100次 膠回收及PCR片段純化兩用試劑盒 DNABACK & PCR Clean-Up Kit 常溫保存
2 ug pGL3- enhancer pGL3- enhancer 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
瓊脂B Agar medium B (Casein soya bean digest agar) 250g
1瓶 HEL細(xì)胞株 HEL 低溫運(yùn)輸和保存
0.85%無菌生理鹽水（9ml/支） 0.85% Sterile Saline 9ml*20支/包
10mg 親和素 Avidin -20℃保存
125mL RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液）,20X，pH7.4 RNase-Free TE Buffer,20X，pH7.4 常溫保存
1 管 JM83大腸桿菌 JM83 E.coli Strain -80℃保存
2 ug pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
250mL 動物RNAout (TRIzol) Animal RNAOUT（TRIzol） 4℃保存
2 ug pcDNA3.1-EGFP pcDNA3.1-EGFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒熒光法phospho-RPA32/RPA2(Thr21) 磷酸化復(fù)制因子A蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-p40phox (Thr154) 磷酸化嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4抗體 規(guī)格: 0.1ml
APOA1 載脂蛋白A1抗體 規(guī)格: 0.1ml
ADCY1 苷酸環(huán)化1抗體 0.2ml
TLR7 Toll樣受體7抗體 規(guī)格: 0.1ml
TNFRSF19 瘤壞死因子配體超家族成員19抗體 規(guī)格: 0.1ml
ChRM1/Acetylcholine receptor(M1) 毒蕈堿型乙酰受體M1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml
MRCK alpha/CDC42BPA CDC42結(jié)合蛋白激α抗體（MRCKα） 規(guī)格: 0.2ml
IL-5 白細(xì)胞介素5抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-Caveolin-2(Tyr19) 磷酸化細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體 規(guī)格: 0.1ml
MCC 大腸瘤突變蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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環(huán)保在線