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更新時(shí)間：2023-12-25 15:41:42瀏覽次數(shù)：489評(píng)價(jià)
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| 貨號(hào) | BK-01S6768 |
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特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：總糖含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
檢測(cè)方法：可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6768
產(chǎn)品分類：糖代謝系列
商品介紹：
測(cè)定意義: 糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)?？偺且部煞Q為碳水化合物，包括可溶性的單糖，二糖以及不溶性的淀粉，纖維素，幾丁質(zhì)等。 測(cè)定原理： 總糖酸水解為還原糖，在NaOH和丙三醇存在下，DNS試劑與還原糖共熱后被還原成氨基化合物，在過(guò)量的NaOH堿性溶液中呈桔紅色，在540nm處有最大吸收峰，以此測(cè)定樣品中的總糖含量。 需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)、沸水浴、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
1瓶 SGC-7901/DDP細(xì)胞株 SGC-7901/DDP 低溫運(yùn)輸和保存
甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂 Toluidine Blue DNAse Agar 100
10g 葡聚糖 T-70 Dextran T-70 室溫保存
50T 大豆35S/SS PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
10次 預(yù)染蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(14.4-97.4 KD) Prestained Protein Marker -20℃保存
2 ug pYFP-Membrane pYFP-Membrane 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
50次 柱式BAC DNAout Column BAC DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)
2 ug pET-30 Xa/LIC pET-30 Xa/LIC 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
BCYE-CYS瓊脂基礎(chǔ) BCYE-Cys Agar Base 100g
1瓶 7WPS1細(xì)胞株 7WPS1 低溫運(yùn)輸和保存
3%氯化鈉堿性蛋白胨水顆粒 3%NaCl Alkaline Peptone Water 225ml/袋*10
總糖含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法TRIM41 環(huán)指蛋白調(diào)節(jié)蛋白激C蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.3ml
CCL11/Eotaxin 1 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
C20orf132 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框132抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAM50B FAM50B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
DEAF1/Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1 畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Cyclin D1 (Thr286) 磷酸化cyclin D1抗體 規(guī)格: 0.1ml
PCDHGA12 原鈣粘蛋白γA12抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/AP 堿性磷酸（AP）標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
RAP1A 抗Rap1A抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-Cdc25B (Ser186) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 規(guī)格: 0.1ml
ANKRD42 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體 規(guī)格: 0.2ml
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是（1）試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒(méi)有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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