目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖代謝系列>> α葡萄糖苷酶（α GC）測試盒微量法
| 貨號 | BK-01S6743 |
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本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
α葡萄糖苷酶（α GC）測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6743 |
商品介紹：
測定意義: α-GC(EC 3.2.1.20)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化水解芳基或烴基與糖基之間的α-糖苷鍵生成葡萄糖，不僅與細(xì)胞壁的松弛或加固有關(guān)，而且與細(xì)胞識別和一些信號分子產(chǎn)生密切相關(guān)。 測定原理： α-GC分解對-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成對-硝基，后者在400nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算α-GC活性。 自備用品： 可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋，即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
Hanks氏病毒保存液（pH7.4-7.6） 3ml*36支/盒
10mg 中性蛋白 Neutral Protease 4℃保存
250mL Sodium Carbonate Bicarbonate,0.5M,pH8.5 Sodium Carbonate Bicarbonate,0.5M,pH8.5 常溫保存
1 管 TG1大腸桿菌 TG1 E.coli Strain -80℃保存
2 ug pSecTag B pSecTag B 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
5次 大提柱式藻類RNAout
2 ug pCGPV pCGPV 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
MR-VP生化鑒定管 20支
250mg 新生 Novobiocin Sodium Salt 4℃保存
50T 病毒基因分型PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
100 mg MEQ，（6-甲氧-N-乙基） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
α葡萄糖苷酶（α GC）測試盒微量法SENP1 小泛素相關(guān)修飾蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
NCoR1 核受體輔助抑制因子1抗體 規(guī)格: 0.1ml
TIAF1 TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-RAD9(Ser328) 磷酸化細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-chicken IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml
SUMO 1 類泛素蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
MAGED1 黑色素瘤相關(guān)抗原D1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml
PCDHGC4 原鈣粘蛋白γC4抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD138/Syndecan 1 多配體蛋白聚糖1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
phospho-TPH(Ser260) 磷酸化色羥化抗體 規(guī)格: 0.1ml
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
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