目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖代謝系列>> 幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒可見分光光度法
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更新時(shí)間：2023-12-26 07:41:39瀏覽次數(shù)：780評(píng)價(jià)
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| 貨號(hào) | BK-01S6752 |
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
檢測(cè)方法：可見分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6752
產(chǎn)品分類：糖代謝系列
商品介紹：
測(cè)定意義: 幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動(dòng)物的外殼與軟體動(dòng)物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細(xì)胞壁中。而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點(diǎn)。 測(cè)定原理： 幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖，進(jìn)一步與DNS試劑反應(yīng)產(chǎn)生棕紅色化合物，在540nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、水浴鍋、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、甲苯（土壤樣品專用）和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
1g 潮 B Hygromycin B 4℃保存
50T 藍(lán)舌病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
5mL 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
25mL Agarose Gel Loading Buffer-Glycero (甘油型上樣液)，6X Agarose Gel Loading Buffer-Glycero ，6X 常溫保存
10mL DNA上樣液 (紅色),6×（非甘油） DNAON 4℃保存
2 ug pGL4.17[luc2/Neo] pGL4.17[luc2/Neo] 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
抗生素檢定培養(yǎng)基1號(hào)（低pH) AntibioticAgar 250g
1瓶 CRT細(xì)胞株 CRT 低溫運(yùn)輸和保存
TCBS瓊脂平板（9cm） Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 10個(gè)/包
100mg 辣根過氧化物，偶聯(lián)級(jí) Horseradish Peroxidase，Conjugation Grade -20℃保存
250mL PIPES Buffer，1.0M, pH6.8 PIPES Buffer，1.0M, pH6.8 常溫保存
幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒可見分光光度法UGP2 尿苷酰二磷酸葡萄糖焦磷化2抗體 規(guī)格: 0.2ml
P4HB 蛋白二硫鍵異構(gòu)P4HB抗體 規(guī)格: 0.2ml
MPP9/MPHOSPH9 有絲分裂細(xì)胞周期蛋白MPP9抗體 規(guī)格: 0.2ml
Inhibin Beta C 抑制素βC抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-CDK6 (Tyr13) 磷酸化周期素依賴性激6抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
SRF/SAP2/MCM1 生激素釋放因子抗體(清應(yīng)答因子) 規(guī)格: 0.2ml
PDC6I/Alix 調(diào)亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白/多巴胺受體相互作用蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
CDKN1C/p57 Kip2 周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體 規(guī)格: 0.1mlMrpL39 線粒體核糖體蛋白L39 規(guī)格: 0.1ml
Nav1.5/SCN5A 電壓門控鈉通道5α抗體 規(guī)格: 0.2mlInvolucrin 囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體 0.2ml
PDGFRA 小板源性生因子受體A抗體(PDGFRα) 規(guī)格: 0.1mlPhospho-MYPT1(Thr696) 磷酸化肌球蛋酸抗體 規(guī)格: 0.1ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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