目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氮代謝系列>> 天冬酰胺合成酶（AS)測(cè)試盒微量法
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更新時(shí)間：2023-12-27 18:58:25瀏覽次數(shù)：555評(píng)價(jià)
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| 貨號(hào) | BK-01S6512 |
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注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是（1）試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒(méi)有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：天冬酰胺合成酶（AS)測(cè)試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
檢測(cè)方法：微量法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6512
產(chǎn)品分類：氨基酸代謝系列
商品介紹：
測(cè)定意義: 天冬酰胺合成酶是廣泛存在于生物體內(nèi)的一類氨基轉(zhuǎn)移酶，催化谷氨酞胺的氨基向天冬轉(zhuǎn)移。當(dāng)植物處于氨毒時(shí)天冬酞胺的形成是一種解毒反應(yīng)。測(cè)定原理： AS催化L-天冬酰胺水解成L-天冬和氨，利用奈氏試劑檢測(cè)氨增加的速率，即可計(jì)算其酶活性。 需自備儀器和用品： 臺(tái)式離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、冰和雙蒸水。 |
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
1瓶 A2細(xì)胞株 A2 低溫運(yùn)輸和保存
1臺(tái) 分子雜交爐 Hybridization Oven 常溫
100次 總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒（FRAP法） Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
DNA甲基綠瓊脂基礎(chǔ) Dnase Agar Base with Methyl Green 100
100次 真菌種屬鑒定 PCR Mix 5（RPB1） Fungal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pALEX b pALEX b 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
氧化胺培養(yǎng)基 TMAO Medium 250g
1瓶 Saos-2細(xì)胞株 Saos-2 低溫運(yùn)輸和保存
胰蛋白胨大豆肉湯 250g
1g 二乙酸熒光素 Fluorescein Diacetate -20℃避光保存
50T 創(chuàng)傷弧菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
天冬酰胺合成酶（AS)測(cè)試盒微量法MBNL3 毒蕈堿樣蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2mlNGN3/Neurogenin 3 神經(jīng)元素3抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596) 磷酸化內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪激A2+A3+A4抗體 規(guī)格: 0.1mlGPR65 G蛋白偶聯(lián)受體65抗體 規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
BrdU 溴脫氧尿苷抗體 規(guī)格: 0.1ml
OCIAD1 卵巢免疫反應(yīng)抗原抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7) 磷酸化熱休克蛋白90α抗體 規(guī)格: 0.1ml
RAB21 G蛋白家族RAB21蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
PCDH8 原鈣粘附蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-Tau protein(Ser356) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
LTB4-R1/BLTR 白三烯B4受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
DPEP3 膜二肽3抗體 規(guī)格: 0.2ml
TFDP3 轉(zhuǎn)錄因子DP3抗體（肝相關(guān)抗原661） 規(guī)格: 0.2ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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