雞法氏囊病毒抗體檢測試劑盒

（版本號：2011-1）

【名    稱】

通用名： IBDV IgG抗體檢測ELISA試劑盒

【原    理】

本品系由包被IBDV 重組抗原的微孔板和酶標(biāo)記抗雞IgG及其他試劑組成，應(yīng)用酶免法原理（ELISA）檢測雞血清或卵黃中IBDV IgG抗體。

【使用意義】

雞法氏囊病是由傳染漢钷囊病毒引起的一種生接觸性傳染病。雞傳染性法氏囊炎是青年雞的一種急性、接觸性傳染病。臨本病的危害主要是病毒侵害雞的體游人免疫中樞--法氏囊，使雞的法氏囊的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生受到破壞，降低或不能產(chǎn)生免疫球蛋白，導(dǎo)致免疫機(jī)能障礙。在預(yù)防免疫工作中,zui值得關(guān)注的就是強(qiáng)化免疫的接種時機(jī)問題。該試劑盒檢測反映抗體水平，利于指導(dǎo)免疫時機(jī)。

【試劑盒組成】

1. IBDV抗原包被微孔板條       96T×1
2. 酶標(biāo)記物                    11ml×1
3. 樣品稀釋液                  20ml×1
4. 顯色劑A/B                7 ml每瓶
5. 洗滌液（用前1：25稀釋）    20 ml×1
6. IBDV抗體陽性對照血清      0.7 ml×1
7. IBDV抗體陰性對照血清      0.7 ml×1
8. 終止液                       7 ml×1

【規(guī)格】

96頭份/盒

【使用方法】

1. 使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。
2. 取所需用量包被微孔板條，設(shè)空白、陰性及陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3. 陰性、陽性對照孔分別加陰性、陽性對照血清100μl；樣品孔樣本1：100稀釋后加100μl；空白對照孔不加。
4. 混勻，置37℃溫浴30分鐘。
5. 扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。
6. 每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。
7. 置37℃溫浴30分鐘。
8. 洗滌，同步驟5。
9. 每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。
10. 每孔加終止液50μl，混勻，置酶標(biāo)儀450nm處測各孔A值（建議用雙波長450nm、630nm）。

【結(jié)果判定】

陰性對照：正常情況下，陰性對照孔A值≤0.1；

陽性對照：正常情況下，陽性對照孔A值≥0.4；

臨界值（C.O.）的計算：臨界值=0.15+陰性對照孔均值；所有陰性、陽性對照和樣品的A值均須減去空白平均值后作為計算值；陰性對照孔A值大于0.10時應(yīng)舍棄，如所有陰性對照孔A值都大于0.10時須重復(fù)實驗；陰性對照孔低于0.05時以0.05計算。（該cut-dff值依據(jù)瓊擴(kuò)實驗計算得出的）

結(jié)果判定：檢測標(biāo)本A450值≥臨界值判定為本試驗陽性；檢測標(biāo)本A450值＜臨界值判定為陰性。

【注意事項】

操作時必須戴手套，穿工作衣，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。

試驗結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。

洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。

所有樣品洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

微孔板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)在室溫中平衡至潮氣干盡后方可，未用完的微孔板須放入有干燥劑的密封袋中保存。

用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。

剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

不同批號試劑組分不得混用。

【保存與有效期】

于2～8℃避光保存，有效期自成品檢定合格之日起為12個月。