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CRISPR/Cas9系統(tǒng)——
是一種靈活、簡(jiǎn)單的、可以對(duì)特定基因組位點(diǎn)進(jìn)行切割置換的系統(tǒng),該系統(tǒng)特異性高、細(xì)胞毒性低。CRISPR/Cas9系統(tǒng)是利用Cas9核酸酶在向?qū)NA的指引下通過(guò)識(shí)別基因組的任何位點(diǎn)保守的間隔相鄰基序(PAM,序列為NGG),在PAM的上游對(duì)DNA進(jìn)行定點(diǎn)切割。使用pCas-Guide系統(tǒng)可以很簡(jiǎn)便的為內(nèi)源性基因標(biāo)記標(biāo)簽。除此之外,pCas-Guide系統(tǒng)的供體載體(rescue donor vectors)也可以用于其他的基因組工程,如基因抑制(突變,缺失,插入),用于啟動(dòng)子研究的熒光素酶報(bào)告基因置換或綠色熒光蛋白基因置換,基因敲入以及用于治療的基因修復(fù)等。Cas9 Further Reading
Genome editing of human pluripotent stem cells to generatehuman cellular disease models.Dis Model Mech. 2013 Jun 10
Biotechnology: Rewriting a genome.Nature 2013 Mar 7;495(7439):50-1
RNA-Guided Human Genome Engineering via Cas9.Science 2013 Feb 15;339(6121):823-6
Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems.Science 2013 Feb 15;339(6121):819-23
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