通常情況下,分子生物學(xué)研究都是針對組織樣本或者一個(gè)細(xì)胞群來進(jìn)行。然而,組織樣本中一般包含多種類型的細(xì)胞,即使來自于同一個(gè)細(xì)胞群的各個(gè)細(xì)胞間的基因水平、表達(dá)水平會(huì)存在不同程度的差異,互為異質(zhì)細(xì)胞。以組織或細(xì)胞群為起始樣本的研究,可能會(huì)因?yàn)榧?xì)胞異質(zhì)性而獲得錯(cuò)誤的結(jié)果。以腫瘤發(fā)生為例,腫瘤的發(fā)生是單細(xì)胞中多種突變積累演化的結(jié)果,一個(gè)腫瘤組織中往往會(huì)包含處于不同階段的腫瘤細(xì)胞甚至前腫瘤細(xì)胞。采取組織樣本進(jìn)行研究,稀有卻重要的基因突變很可能淹沒在背景數(shù)據(jù)中,而采用單細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)則可避免上述的情況出現(xiàn),獲得更可靠更有意義的結(jié)果。
單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)在腫瘤、干細(xì)胞、神經(jīng)、生殖、微生物學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域以及法醫(yī)學(xué)中應(yīng)用廣泛,主要是基于以下特點(diǎn):
u 單細(xì)胞亦包含一個(gè)物種全部的遺傳信息;
u 單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)避免了細(xì)胞異質(zhì)性的干擾,準(zhǔn)確性更高。
u 單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)有利于還原生物事件本身,諸多生物事件如胚胎發(fā)育、腫瘤形成及轉(zhuǎn)移等均以單細(xì)胞為起點(diǎn)。
瑞士MMI(Molecular Machines & Industries)公司推出的單細(xì)胞獲取平臺(tái)為獲取單細(xì)胞提供了完整的解決方案,該工作站的建立是基于MMI公司的兩大旗艦產(chǎn)品:CellEctor Plus單細(xì)胞分選系統(tǒng)和CellCut Plus激光顯微切割系統(tǒng):
u CellEctor Plus可從血液、骨髓、制備的組織細(xì)胞懸浮等液態(tài)體系中挑選出感興趣的單細(xì)胞;
u CellCut Plus可從組織切片、貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中將感興趣的單細(xì)胞切割并收集下來。
CellEctor Plus和CellCut Plus均是基于顯微鏡的產(chǎn)品,兩大系統(tǒng)可*整合在一起形成MMI單細(xì)胞獲取自動(dòng)化工作站,以“所見即所得”的方式,幾乎涵蓋所有的單細(xì)胞獲取途徑,結(jié)合單細(xì)胞擴(kuò)增儀和相關(guān)耗材可進(jìn)行下游基因、蛋白水平的研究。
MMI單細(xì)胞獲取自動(dòng)化工作站通過細(xì)胞識別、細(xì)胞挑取和細(xì)胞轉(zhuǎn)移三個(gè)步驟可以實(shí)現(xiàn)對懸浮體系中任何單一類型細(xì)胞或稀有細(xì)胞(如循環(huán)腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞以及血液、骨髓中相關(guān)細(xì)胞等)的分離,細(xì)胞可以轉(zhuǎn)移到PCR管等后續(xù)實(shí)驗(yàn)裝置。MMI公司結(jié)合單細(xì)胞擴(kuò)增的相關(guān)儀器、耗材形成了單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的完整方案。
MMI單細(xì)胞獲取自動(dòng)化工作站可利用固態(tài)紫外激光對組織切片等樣本中感興趣的細(xì)胞進(jìn)行切割和收集, “三明治”式的樣本制備方式避免環(huán)境尤其是RNase污染,高頻低能的激光幾乎不會(huì)造成樣本的損傷,利用粘性管蓋的樣本收集方式既避免污染,又能zui大限度地避免損傷樣本。CellCut Plus還能對貼壁培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行切割收集。
MMI單細(xì)胞獲取自動(dòng)化工作站采用PTP(Predefined Target Positioning)技術(shù),可將黏性管蓋劃分成若干區(qū)域,對組織切片中同種類型細(xì)胞進(jìn)行黏附收集,提高樣品的收集效率,節(jié)省成本;通過計(jì)量統(tǒng)計(jì)可保證下游的核酸、蛋白實(shí)驗(yàn)有足夠的樣本量。
MMI單細(xì)胞獲取自動(dòng)化工作站集合激光顯微切割和自動(dòng)化毛細(xì)管技術(shù),幾乎涵蓋了所有可能的單細(xì)胞獲取方式,使得基于單細(xì)胞的分析和實(shí)驗(yàn)更為快捷,相信會(huì)給腫瘤、干細(xì)胞、神經(jīng)、生殖、微生物學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域的研究者們帶來巨大的便利。
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