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初級(jí)會(huì)員 | 第5年

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熒光探針
熒光淬滅劑標(biāo)記的亞磷酰胺
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百螢課堂-之細(xì)胞代謝

時(shí)間:2023/12/20閱讀:77
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一、細(xì)胞代謝概述

   

   細(xì)胞代謝的特征是細(xì)胞內(nèi)發(fā)生變化的總和,通過這些變化,能量與成分被用于各種生化過程。細(xì)胞呼吸是細(xì)胞新陳代謝的一種功能,它分解糖和其他單糖,并通過化學(xué)方式利用產(chǎn)生的ATP來產(chǎn)生能量。

 

   細(xì)胞呼吸主要涉及三個(gè)步驟:糖酵解、檸檬酸循環(huán)和氧化磷酸化。這些過程共同形成各種構(gòu)建快,用于創(chuàng)建許多必須分子,包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸和碳水化合物。廢物的處理是細(xì)胞新陳代謝的一項(xiàng)重要功能,可以功能性地排泄?jié)撛谟卸境煞?,包括含氮化合物、磷酸鹽和硫酸鹽。由于細(xì)胞代謝與許多已知的生物途徑(氨基酸代謝和運(yùn)輸、尿素循環(huán)、碳水化合物耐受性、糖原儲(chǔ)存、脂肪酸氧化和線粒體活性等)相關(guān),因此了解其在細(xì)胞生理學(xué)中的作用的重要性、疾病病理學(xué)和病因?qū)W不應(yīng)被低估。

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1.TCA循環(huán)及其在脂質(zhì)代謝中的作用概述。

 

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二、方法與分析

   

   常見的檢測(cè)和評(píng)估細(xì)胞代謝活動(dòng)的技術(shù)之一是通過比色法或熒光法測(cè)定。這些測(cè)定針對(duì)已知相關(guān)途徑的特定分析物,例如在鑒定糖酵解途徑時(shí)可以選擇檢測(cè)葡萄糖、己糖激酶、丙酮酸、丙酮酸激酶,乳酸和糖原。在脂肪酸代謝中,甘油三酯、游離脂肪酸和焦磷酸鹽可能是靶標(biāo)。此外,在觀察尿素代謝時(shí)可以選擇尿素、谷安酸或L-精安酸,并且ATP,NAD,NADH,NADPNADPH(或其組合)可以針對(duì)總體代謝活性。這些檢測(cè)方法可以作為試劑盒在市場(chǎng)上買到,雖然每種方法的技術(shù)規(guī)格略有不同,但是每種方法的許多步驟是相似的。

 

表一.用于測(cè)量ATP活性、形成或消耗的生化測(cè)定。

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表二.NAD/NADHNADP/NADPH檢測(cè)比較

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