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Amplite 熒光法單胺氧化m檢測(cè)試劑盒是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的谷an酸檢測(cè)的試劑盒，單胺氧化酶（MAO）屬于核黃素含氨氧化酶，它可以催化單氨的氧化。它存在于許多組織包括肝臟，腸粘膜和神經(jīng)所含線粒體的外膜上。在人體內(nèi)有兩種類型的MAO：MAO-A和MAO-B。MAO-A在攝取的食物中單氨的代謝過程中非常重要。MAOs在神經(jīng)遞質(zhì)失活過程扮演者主要角色。在抑郁癥，精神分裂癥，濫用，注意力不集中，偏頭疼或者性早熟疾病中，都伴隨著MAO的功能紊亂。Amplite單胺氧化酶檢測(cè)試劑盒提供了一種快速超敏感的方法，來檢測(cè)血液樣本或者其他生物樣本內(nèi)的單胺氧化酶或者氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)的活性。該試劑盒使用我們的Amplite Red底物使其成為雙記錄模式。紅色的熒光信號(hào)很容易的通過熒光酶標(biāo)儀（540／590nm）檢測(cè)到或者被酶標(biāo)儀（576nm）檢測(cè)。Amplite 單胺氧化酶檢測(cè)試劑盒在100 ul檢測(cè)體積中能檢測(cè)到10U／ml的單胺氧化酶。本試劑盒可以用于96或384微孔板分析，并且無需任何分步驟，就可以輕易地實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 熒光法單胺氧化m檢測(cè)試劑盒。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡要概述

1.MAO標(biāo)準(zhǔn)品或測(cè)試樣品（50μL）
2.添加MAO工作溶液（50μL）
3.在室溫下孵育30-60分鐘
4.在Ex / Em = 540/590 nm處讀取熒光強(qiáng)度（截止570 nm）

溶液制備

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. Amplite 紅色儲(chǔ)備液（250X）：
將40μLDMSO（組分F）加入到Amplite TM Red底物（組分A）的小瓶中。應(yīng)立即使用原液。注意：在硫醇如二硫蘇糖醇（DTT）和2-巰基y醇存在下，Amplite Red底物不穩(wěn)定。反應(yīng)中DTT或2-巰基y醇的終濃度應(yīng)不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不穩(wěn)定。因此，反應(yīng)應(yīng)在pH7-8下進(jìn)行。推薦使用所提供的測(cè)定緩沖液，pH7.4。

2. HRP解決方案（200X）：
將100μL測(cè)定緩沖液（組分B）加入到辣根過氧化物酶（組分C）的小瓶中。

3.血漿胺氧化酶（PAO）標(biāo)準(zhǔn)溶液（20 U / mL）：
將125μL測(cè)定緩沖液（組分B）加入等離子體胺氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品（組分E）的小瓶中。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

谷an酸氧化酶標(biāo)準(zhǔn)
將30μL150mU/ mL GO標(biāo)準(zhǔn)溶液加入420μL測(cè)定緩沖液（組分B）中，得到10mU / mL GO標(biāo)準(zhǔn)溶液（GO7）。取10 mU / mL GO標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋，得到剩余的連續(xù)稀釋的GO標(biāo)準(zhǔn)品（GO6-GO1）。

3.工作溶液

將20μLDelterite Red原液（250X），25μLHRP儲(chǔ)備液（200X）和25μLMAO底物（組分D）加入5 mL分析緩沖液（組分B）中，使總體積為5.07 mL 單胺氧化酶（MAO）工作溶液,避光。