Amplite 比色法L-天門冬an酸檢測(cè)試劑盒是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的用于檢測(cè)天門冬an酸的試劑盒，天冬氨酸（或天冬氨酸）是帶負(fù)電荷的極性氨基酸。 天冬氨酸參與嘧啶生物合成的控制點(diǎn)，轉(zhuǎn)氨反應(yīng)，與天冬酰胺的相互轉(zhuǎn)化，在尿素循環(huán)中導(dǎo)致AMP的代謝途徑中，并且是高絲an酸，蘇an酸，異亮an酸和甲硫an酸的前體。 它也參與蘋果酸天冬氨酸穿梭。 Amplite 比色天冬氨酸測(cè)定試劑盒為生物樣品中天冬氨酸的定量分析提供了靈敏的比色測(cè)定。 天冬氨酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸，通過酶偶聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)生過氧化氫。 天冬氨酸產(chǎn)生的過氧化氫的量用Amplite Red底物監(jiān)測(cè)，用于通過在575nm處的吸光度酶標(biāo)儀來定量天冬氨酸。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 比色法L-天門冬an酸檢測(cè)試劑盒 。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.準(zhǔn)備測(cè)試樣品（50 µL）以及連續(xù)稀釋的天冬氨酸標(biāo)準(zhǔn)品（50 µL）
2.加入等體積的工作溶液（50 µL）
3.在37°C下孵育20-30分鐘
4.監(jiān)測(cè)吸光度在575±5 nm處的增加

溶液制備

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 天冬氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（10 mM）：
將100 µL ddH2O加入天冬氨酸標(biāo)準(zhǔn)樣品瓶（組分E）中，制成10 mM天冬氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2 Amplite Red底物儲(chǔ)備液：
向Amplite Red底物（組分A）中加入50 µL DMSO（組分F），制成200X Amplite Red底物原液。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

天冬氨酸標(biāo)準(zhǔn)
向990 µL 1X PBS緩沖液中加入10 µL 10 mM天冬氨酸標(biāo)準(zhǔn)液，得到100 µM天冬氨酸溶液（ASP7）。 然后在1X PBS緩沖液中進(jìn)行1：2的系列稀釋，以得到系列稀釋的天冬氨酸標(biāo)準(zhǔn)品（ASP6-ASP1）。

3.工作溶液

3.1 Conversion Mix（100X）：
將50 µL ddH2O加入轉(zhuǎn)化混合液（組分D）中，制成100X轉(zhuǎn)化混合液。

3.2 Amplite Red：
將5 mL測(cè)定緩沖液（組分C）加入一瓶酶混合1瓶（組分B1）中，并充分混合。 將100μLddH2O加入一個(gè)酶混合物2小瓶（組分B2）中，并充分混合。 將整個(gè)小瓶（100μL）的酶混合液2、25μL的200X Amplite Red底物儲(chǔ)備液和50μL的100X Conversion Mix溶液轉(zhuǎn)移到Enzyme Mix 1瓶中并充分混合。 注意：工作溶液不穩(wěn)定，請(qǐng)立即使用，并避免直接暴露在光線下。