圖1.時(shí)間分辨熒光能量轉(zhuǎn)移（TR-FRET）是時(shí)間分辨熒光法（TRF）與F?rster共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）的實(shí)際結(jié)合，為藥物發(fā)現(xiàn)研究人員提供了強(qiáng)大的工具。 TR-FRET將TRF的低背景方面與FRET的均相測(cè)定形式結(jié)合在一起。除更高的通量和更少的假陽(yáng)性/假陰性結(jié)果外，所得測(cè)定法還提高了靈活性，可靠性和靈敏性。 FRET涉及兩個(gè)熒光團(tuán)，一個(gè)供體（例如trFluor Eu和trFluor Tb）和一個(gè)受體。如果能量源（例如閃光燈或激光器）對(duì)供體的激發(fā)，則如果兩者在給定的彼此鄰近范圍內(nèi)，則將能量轉(zhuǎn)移至受體。受體繼而以其特征波長(zhǎng)發(fā)射光。該技術(shù)的FRET方面受多種因素驅(qū)動(dòng)，包括光譜重疊和所涉及的熒光團(tuán)的鄰近性，其中僅當(dāng)施主與受主之間的距離足夠小時(shí)才發(fā)生能量轉(zhuǎn)移。實(shí)際上，F(xiàn)RET系統(tǒng)的特征在于F?rster半徑（R0）：FRET效率為50％時(shí)熒光團(tuán)之間的距離。對(duì)于許多FRET配對(duì)，R0介于20至90?之間，具體取決于所使用的受體和檢測(cè)中熒光團(tuán)的空間排列。通過(guò)測(cè)量這種能量轉(zhuǎn)移，可以通過(guò)將每個(gè)配偶與熒光標(biāo)記偶聯(lián)并檢測(cè)能量轉(zhuǎn)移的水平來(lái)評(píng)估生物分子之間的相互作用。可以檢測(cè)受體發(fā)射作為能量轉(zhuǎn)移的量度，而無(wú)需將結(jié)合的與未結(jié)合的測(cè)定成分分開(kāi)（例如過(guò)濾或洗滌步驟），從而減少了測(cè)定時(shí)間和成本。