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技術(shù)文章
蛋白質(zhì)的透析
點擊次數(shù):359 發(fā)布時間:2013-3-26
一、目的
學(xué)習(xí)透析的基本原理和操作。
二、原理
蛋白質(zhì)是大分子物質(zhì),它不能透過透析膜而小分子物質(zhì)可以自由透過。在分離提純蛋白質(zhì)的過程中,常利用透析的方法使蛋白質(zhì)與其中夾雜的小分子物質(zhì)分開。
三、器材
1、透析管或玻璃紙2、燒杯
3、玻璃棒4、電磁攪拌器
5、試管及試管架
四、試劑
1、蛋白質(zhì)的氯化鈉溶液3 個除去卵黃的雞卵蛋清與700mL 水及300mL 飽和氯化鈉溶液混合后,用數(shù)層干紗布過濾。
2、10%硝酸溶液
3、1%*溶液
4、10%氫氧化鈉溶液
5、1%硫酸銅溶液
五、操作 蛋白實驗技術(shù)論壇 /forum-139-1.html
1、用蛋白質(zhì)溶液作雙縮脲反應(yīng)。
2、向火棉膠制成的透析管中裝人10~15mL 蛋白質(zhì)溶液并放在盛有蒸餾水的燒杯中(或用玻璃紙裝入蛋白質(zhì)溶液后扎成袋形,系于一橫放在燒杯的玻璃棒上)。
3、約1 小時后,自燒杯中取水1~2mL,加10%硝酸溶液數(shù)滴使成酸性,再加入1%*溶液1~2 滴,檢查氯離子的存在。
4、從燒杯中另取1~2mL 水,做雙縮脲反應(yīng),檢查是否有蛋白質(zhì)存在。
5、不斷更換燒杯中的蒸餾水(并用電磁攪拌器不斷攪動蒸餾水)以加速透析過程。數(shù)小時后從燒杯中的水中不能再檢出氯離子。此時停止透析并檢查透析袋內(nèi)容物是否有蛋白質(zhì)或氯離子存在(此時應(yīng)觀察到透析袋中球蛋白沉淀的出現(xiàn),這是因為球蛋白不溶于純水的緣故)。