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上海鼎杰生物科技有限公司
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閱讀:1851發(fā)布時(shí)間:2012-4-23
DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚,能與DNA強(qiáng)力結(jié)合的熒光染料,常用與熒光顯微鏡及共聚焦觀測(cè)。DAPI可以透過(guò)完整的細(xì)胞膜,用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色。分子式為C16H15N5·2HCl ,分子量為350.25。
DAPI可以穿透細(xì)胞膜與細(xì)胞核中的雙鏈DNA結(jié)合而發(fā)揮標(biāo)記的作用,可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光。顯微鏡下可以看到顯藍(lán)色熒光的細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察細(xì)胞標(biāo)記的效率高(幾乎為100 %) ,且對(duì)活細(xì)胞無(wú)毒副作用。DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。細(xì)胞經(jīng)熱激處理后用DAPI染色3分鐘,在熒光顯微鏡下可以看到到細(xì)胞核的形態(tài)變化。
DAPI的zui大激發(fā)波長(zhǎng)為340nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)為488nm, DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后,zui大激發(fā)波長(zhǎng)為360nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm。
本DAPI染色液(DAPI Staining Solution)可以直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
保存條件 : -20℃避光保存,一年有效。
注意事項(xiàng) :
熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液??篃晒獯銣绶馄海ㄒ?guī)格:5ML)。 DAPI對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
為了您的安全和健康,使用時(shí)戴一次性手套操作。
染色步驟
1. 對(duì)于固定后的細(xì)胞或組織樣品,適當(dāng)洗滌去除固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,可*行免疫熒光染色,染完畢后再進(jìn)行DAPI染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行DAPI染色。
2. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品體積3倍的色液,混勻。
3. 室溫孵育5-10分鐘。
4. 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘,洗掉未結(jié)合的DAPI。
5. 用帶有360nm激發(fā)波長(zhǎng),460nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品編號(hào):C-0033
英文名稱:DAPI (Nuclear Labeling Kit)
中文名稱:DAPI染色液(細(xì)胞核染色液)
別 名:4',6-diamidino-2-phenylindole...
產(chǎn)品規(guī)格:10ml/ 30ml
產(chǎn)品類型:常用試劑
研究領(lǐng)域:免疫學(xué)
保存條:Store at -20 °C for one year.
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