組織或細(xì)胞勻漿樣本的制備

收集組織或細(xì)胞樣本，加入勻漿介質(zhì)后進(jìn)行勻漿，有4種勻漿方式可以選擇。

1) 手工勻漿：將樣本（含勻漿介質(zhì)）倒入玻璃勻漿管中，左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的容器中，右手將搗桿垂直插入勻漿管中，上下轉(zhuǎn)動(dòng)研磨數(shù)十次（6-8 min），使組織勻漿化。

2) 機(jī)械勻漿：將已稱重的組織裝入EP管，加入勻漿介質(zhì)，用組織勻漿機(jī)，在冰水浴條件下，60 Hz，90s研磨制成組織勻漿，皮膚、肌肉組織及植物組織等可適當(dāng)延長勻漿時(shí)間。

3) 超聲破碎：用超聲波發(fā)生器以振幅14 μm超聲處理30s，在冰水浴條件下，破碎細(xì)胞；或者用超聲波破碎儀，200 W，2s/次，間隙3s進(jìn)行處理，總時(shí)間5min。

4) 反復(fù)凍融：適用于細(xì)胞樣本，即用低滲液或雙蒸水重懸細(xì)胞，再將細(xì)胞懸液進(jìn)行“冷凍-融化-冷凍"循環(huán)，重復(fù)3次左右。

值得注意的是，此方法使的某些酶的活力受影響。因此，檢測細(xì)胞樣本的酶活力時(shí)不推薦使用此方法。
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