G-418 遺傳霉素硫酸鹽

             G-418 遺傳霉素硫酸鹽

說明：

真核表達(dá)篩選用抗生素，可以用于篩選表達(dá)特定抗性基因的穩(wěn)定細(xì)胞株。篩選哺乳動(dòng)物細(xì)胞，推薦起始篩選濃度為400微克/毫升；篩選植物細(xì)胞，推薦起始篩選濃度為10微克/毫升；篩選酵母，推薦起始濃度為500微克/毫升。根據(jù)起始濃度的效果可以再適當(dāng)升高或降低G-418的使用濃度。

特性：

可溶于水、甲醇、緩沖液和培養(yǎng)基。溶解后，0.22μm過濾除菌，分成小包裝，4℃可保存12個(gè)月，-20℃保存時(shí)間更長。常用的儲(chǔ)存液使用100mMHEPES(pH7.3)配制，濃度為50mg/ml。使用HEPES配制的好處是： 加入儲(chǔ)存液不會(huì)改變培養(yǎng)體系的pH值。

性狀：

白色粉末，硫酸鹽溶于水、甲醇。

描述：

G418是一種氨基糖苷類抗生素 ,這種氨基糖類抗生素的結(jié)構(gòu)和新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似，在分子遺傳試驗(yàn)中,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染常用的抗性篩選試劑。它通過抑制轉(zhuǎn)座子Tn601，Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對(duì)原核和真核等細(xì)胞產(chǎn)生毒素 ,包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞 ,也包括原生動(dòng)物和蠕蟲。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后 ,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA ,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有 G418的選擇性培養(yǎng)基中生長

用途：

靠干擾核糖體功能阻斷多肽合成。不是常用的標(biāo)準(zhǔn)抗生素，常用于選擇新霉素抗藥基因轉(zhuǎn)染的原核和真核細(xì)胞。在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以廣泛應(yīng)用。

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