【用途】
豬圓環(huán)病毒病ELISA診斷試劑盒用于檢測豬血清中圓環(huán)病毒抗體。
【簡介】
試劑盒由抗原包被的微孔板，酶標(biāo)羊抗豬IgG及其它試劑制成，應(yīng)用間接ELISA原理檢測豬血清中抗Ⅱ型圓環(huán)病毒ORF2蛋白的抗體。
【原理】
本試劑盒是采用豬Ⅱ型圓環(huán)病毒區(qū)ORF2合成肽抗原包被微孔板，在試驗中，按操作步驟加入對照血清和待檢血清，經(jīng)溫育后，若樣品中含有豬Ⅱ型圓環(huán)病毒特異性抗體，則將與微孔板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后；再加入酶標(biāo)二抗，與微孔板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，加入HF溶液中止反應(yīng)后，用酶標(biāo)儀630nm波長測定各反應(yīng)孔中的OD值。
【試劑盒主要成分】
1． 包被抗原的微孔板 2塊 （96孔）
2． 陰（綠蓋）、陽（紅蓋）性對照血清 各1管 （1ml/管）
3． 抗豬IgG-HRP結(jié)合物 （黃蓋） 1瓶 （22ml/瓶）
4． 20倍濃縮洗滌液（白蓋） 1瓶 （30ml/瓶）
5． 底物A（紫蓋）液、B液（黃蓋） 各1瓶 （12ml/瓶）
6． 終止液（藍(lán)蓋） 1瓶 （12ml/瓶）
7． 樣品稀釋液 （透明蓋） 1瓶 （50ml/瓶）
【用前準(zhǔn)備】
仔細(xì)閱讀說明書，所有試劑在4℃條件下保存，禁止結(jié)冰，如果干燥袋發(fā)紅不能使用，不用的孔必須密封好以防潮濕對平板有害，不要使平板接觸強光和氧化物。不要使用過期的成分或混合使用成分。注意加樣和沖洗，以確保試驗的度和準(zhǔn)確度。操作過程中注意安全，要使用手套，終止液含有氫氟酸使用要小心。所有的廢液要經(jīng)過處理和凈化。
本品為獸用產(chǎn)品。
【未提供的需用材料】
微量加樣器、加液槽、蒸餾水、恒溫箱、酶標(biāo)儀、吸水紙
【注意事項】
1、試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫。
2、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用。
3、注意防止試劑盒各組分受污染。
4、微孔板拆封后避免受潮或沾水（每次將剩余的微孔板用封口袋扎緊后盡快置于4℃）。
【試劑配制】
洗滌液：用蒸餾水稀釋20倍濃縮洗滌液，混勻。
【操作步驟】
1、 取預(yù)包被的微孔板（根據(jù)樣品多少，可拆開分次使用），用樣品稀釋液將待檢樣品40倍稀釋后加入板孔中，每孔加100μl。陰、陽性對照各設(shè)2孔，每孔100μl。另設(shè)一空白對照孔，空白對照孔加100μl稀釋液。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37℃溫育30min。
2、 甩掉板孔中的溶液，用洗滌液洗板3次，300μl/孔，每次靜置3分鐘倒掉，zui后一次在不掉屑干凈吸水紙上拍干。
3、 每孔加酶標(biāo)二抗（抗豬IgG-HRP結(jié)合物）100μl，置37℃溫育30min。
4、 洗滌3次, 方法同2。
5、 每孔加底物A液、B液各1滴（50μl），混勻，室溫（20-25℃）避光顯色10min。
6、 每孔加終止液1滴（50μl），10分鐘內(nèi)測定結(jié)果。
【結(jié)果判定】
以空白孔調(diào)零，在酶標(biāo)儀上測各孔OD630值。試驗成立的條件是陽性對照孔平均OD630值大于或等于0.4，陰性對照孔平均OD630值必須小于0.2。
樣品OD630值大于0.4，判為陽性；樣品OD630值在0.2到0.4之間，判為可疑；樣品OD630值小于0.2，判為陰性。
【規(guī)格】 96孔×2塊
【有效期】6個月
【貯存】 2-8℃避光保存
【生產(chǎn)日期】見試劑盒外包裝
提示：酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣，酶標(biāo)板仍然正常有效，不影響實驗結(jié)果，請放心使用。
