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紅細(xì)胞滲透脆性（孵育）實驗

時間：2013-12-20閱讀：968
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實驗原理
　　紅細(xì)胞在低滲鹽溶液 中，當(dāng)水滲透其內(nèi)部達(dá)一定程度時，紅細(xì)胞發(fā)生膨脹、破裂。觀察紅細(xì)胞在不同濃度鹽溶液 中的溶血程度，可以判斷其對低滲鹽溶液的抵抗力，這種抵抗能力與紅細(xì)胞表面積與容積的比值有關(guān)，比值小者，紅細(xì)胞抵抗力較小，脆性增加。反之抵抗力增大。

實驗方法
　　材料：
　　1.171.1mmol/LNaCl溶液、蒸餾 水
　　2.移液管 、試管 、水浴 箱等
　　方法：
　　1.取12支試管 ,分別按下表加入NaCl溶液和蒸餾 水，得不同濃度的NaCl溶液。
試管號
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
171.1 M NaCl溶液（ml）
0.30
0.35
0.40
0.45
0.50
0.55
0.60
0.65
0.70
0.75
0.80
0.85
蒸餾水(ml)
0.95
0.90
0.85
0.80
0.75
0.70
0.65
0.60
0.55
0.50
0.45
0.40
NaClzui終濃度（mmol/L）
41.0
 
47.9
 
54.7
 
61.6
 
68.4
 
75.2
 
82.1
 
88.9
 
95.8
 
102.6
 
109.4
 
116.3
 
 
(g/L)
2.4
2.8
3.2
3.6
4.0
4.4
4.8
5.2
5.6
6.0
6.4
6.8
　　2.每管中加入1滴全血（或者肝素抗凝血），輕輕搖勻,在室溫靜置2h后觀察結(jié)果。
　　3.孵育脆性實驗，先將肝素抗凝全血37℃孵育24h后，再做1.2步檢測。

實驗結(jié)果計算
　　先從高濃度開始觀察,上層溶液出現(xiàn)透明紅色者為開始溶血管,管底紅細(xì)胞*消失者為*溶血管。
　　參考范圍：
　　開始溶血75.2mmol/L-82.1mmol/L（4.4-4.8g/L）NaCl溶液
　　*溶血47.5mmol/L-54.7mmol/L（2.8-3.2g/L）NaCl溶液
　　孵育后
　　開始溶血82.1mmol/L-88.9mmol/L（4.8-5.2g/L）NaCl溶液
　　*溶血54.7mmol/L-61.6mmol/L（3.2-3.6g/L）NaCl溶液

注意事項
　　1．CACL必須干燥后準(zhǔn)確稱量，用前新配。
　　2.每次試驗應(yīng)做正常對照，其結(jié)果應(yīng)在正常范圍內(nèi)，被檢者與正常對照開始溶血管NaCl溶液濃度相差0.4g/L有診斷價值。
　　3.所有器具要干燥，血標(biāo)本應(yīng)直接滴入液體內(nèi)，混勻時不能用力過大，以避免體外溶血。
　　4.在白色背景下觀察結(jié)果，判斷*溶血試管時，可低速離心1min后觀察。
　　5.重度貧血患者紅細(xì)胞太少，黃疸患者開始溶血管不易觀察，均可取肝素抗凝血以生理鹽水洗滌后，再用生理鹽水配成50%的紅細(xì)胞懸液進(jìn)行檢測。
　　6．血液標(biāo)本應(yīng)避免用枸櫞酸鹽、草酸鹽和EDTA 鹽抗凝血，以防增加離子強(qiáng)度。如用以上抗凝血標(biāo)本應(yīng)用洗滌紅細(xì)胞進(jìn)行檢測。

 

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