農桿菌感受態(tài)細胞的制備
取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml*平板劃線，28℃培養(yǎng)。
挑取單菌落接種于5ml YM液體培養(yǎng)基中，220rpm 28℃振蕩培養(yǎng)12-16 hr。
取2ml菌液轉接于100ml YM液體培養(yǎng)基中，28℃220rpm振蕩培養(yǎng)至OD600=0.5。
轉入無菌離心管，5000rpm離心5min,去上清液。
加入10ml預冷的0.1M的CaCl2溶液，輕輕懸浮細胞，冰上放置20min。4℃5000rpm離心5min，去上清。
加入4ml預冷的含15%甘油的0.1M的CaCl2溶液，輕輕懸浮。
農桿菌懸浮液分裝于無菌Eppendorf管中，每管200μl凍存于-70℃。
