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上海士鋒生物科技有限公司
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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養(yǎng)基 維生素檢測培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測培養(yǎng)基 化妝品檢測培養(yǎng)基 動物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗培養(yǎng)基 軍團菌檢測培養(yǎng)基 支原體檢測培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測培養(yǎng)基 弧菌檢測培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測培養(yǎng)基 檢測培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測,增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

士鋒生物染色體制片操作流程

時間:2013/12/10閱讀:681
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1、取對數(shù)生細(xì)胞一個T75或T25瓶。

2、將培養(yǎng)基換成10ml Dmem(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培養(yǎng)基,處理1~2小時。

3、將細(xì)胞培養(yǎng)液倒掉,馬上加入3~4ml 0.1%,并立即搖晃0.5~1min。當(dāng)在顯微鏡下看到分裂相細(xì)胞脫壁后,馬上加入終止液終止消化,并將分裂相細(xì)胞收集在一個15ml的離心管中,并在1200r/min離心4min。

4、將上清液倒掉,剩余50ul左右的液在管中,并輕微震動,使細(xì)胞沉淀重新懸浮。

5、加入10ml的低滲液(0.075M KCL),*毫升要逐滴加入,并邊加邊搖晃。

6、37℃水浴中低滲30min。

7、再加入1ml冰冷的固定液(甲醇:乙酸=3:1 的混合液),并馬上搖勻,離心,1000r/min、10min。

8、同步驟4。

9、加入10ml冰冷的固定液,*毫升要逐滴加入,邊加邊搖晃。

10、室溫下固定30min,然后離心,1000r/min、10min。

11、同步驟4。

12、加入10ml冰冷的固定液,*毫升要逐滴加入,邊加邊搖晃。

13、室溫下固定15min,然后離心,1000r/min、10min。

14、重復(fù)步驟11~13一次。

15、將離心后的上清液倒掉,并加入50~100ul的新鮮固定液重懸細(xì)胞。

16、滴片(玻片要求是濕冷的干凈的,滴片高度要大于30cm。玻片傾斜角度15~30度左右)

17、鏡檢。
 

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