IL-4可作為B細(xì)胞增殖的促進(jìn)因子，1982年在T細(xì)胞培養(yǎng)上清中被發(fā)現(xiàn)，1986年被成功克隆，并統(tǒng)一命名為白細(xì)胞介素4。IL-4除了可作為腫瘤免疫調(diào)節(jié)劑外，近來還發(fā)現(xiàn)可能其可能為敗血癥休克的治療提供一個(gè)新的靶點(diǎn)。
1982年Howard在T細(xì)胞培養(yǎng)上清中發(fā)現(xiàn)一種促進(jìn)B細(xì)胞增殖的因子， 起初命名為B細(xì)胞生長因子-1 (B cell growth factor-1, BCGF-1)。有的實(shí)驗(yàn)室稱為B細(xì)胞刺激因子-1 (B cell stimulating factor-1, BSF-1)、T細(xì)胞生長因子-2 (T cell growth factor-2, TCGF-2)。1986年基因克隆成功，統(tǒng)一命名為白細(xì)胞介素4(interleukin 4, IL-4)。 IL-4對(duì)于B細(xì)胞、T細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和造細(xì)胞都有免疫調(diào)節(jié)作用。
人類IL-4主要由活化T細(xì)胞產(chǎn)生。在小鼠由Th2亞群產(chǎn)生。人與鼠IL-4 DNA水平上有70%同源性， IL-4前體蛋白從N 端到91位氨基酸以及C 端到128位氨基酸人小鼠之間在氨基酸水平上有70%同源性，前體蛋白91至128位氨基酸之間很少有同源性，這可能與IL-4種屬作用特異性有關(guān)，如人、 鼠IL-4生物學(xué)作用上沒有交叉反應(yīng)。
IL-4生物活性的檢測(cè)方法：
1)用人外周血淋巴細(xì)胞檢測(cè)人IL-4
1.用淋巴細(xì)胞分離液分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)。用預(yù)溫的RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞兩次，每次離心400×g 10分鐘，去上清液。
2.用含5%小牛血清和1%(v/v)PHA的RPMI-1640培養(yǎng)液將細(xì)胞稀釋至5×106/ml。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)。加等量含5%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，再加20U/ml IL-2，繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)。
3.用RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞兩次，每次離心250×g 10分鐘，去上清液。用含5%小牛血清和1%(v/v)PHA的RPMI-1640培養(yǎng)液將細(xì)胞稀釋至2×105/ml。以每孔0.1ml將細(xì)胞懸液加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的各孔。
4.倍比稀釋IL-4標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品，標(biāo)準(zhǔn)IL-4從100ng/ml稀釋到0.1pg/ml(共12個(gè)稀釋度)。每孔加0.1ml稀釋樣品，每個(gè)稀釋度三個(gè)復(fù)孔，陰性對(duì)照孔不加IL-4。
5.在37℃ 5% CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)胞48小時(shí)。
6.每孔加0.5μCi(18.5kBq)[3H]脫氧胸苷，繼續(xù)培養(yǎng)18小時(shí)。
7.用多頭細(xì)胞收集器將細(xì)胞收集到玻璃纖維濾紙上，液體閃爍計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)細(xì)胞攝入的同位素活性，用cpm值對(duì)樣品稀釋倍數(shù)作圖。比較標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品的50%zui大cpm值處的不同稀釋倍數(shù)，決定待測(cè)樣品的相應(yīng)濃度。亦可用MTT檢測(cè)法。
2)檢測(cè)IL-4抑制細(xì)胞增殖的活性
1.CCL-185細(xì)胞的培養(yǎng)：培養(yǎng)CCL-185細(xì)胞的培養(yǎng)液是含10%小牛血清、和的HAMs F12K培養(yǎng)液，將細(xì)胞置37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至2×105/ml時(shí)分瓶到5×104/ml，繼續(xù)培養(yǎng)。
2.用CCL-185細(xì)胞檢測(cè)IL-4的生長抑制活性：
1)用上述細(xì)胞培養(yǎng)液倍比稀釋待測(cè)樣品的IL-4標(biāo)準(zhǔn)品，在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔加入0.1ml稀釋液，每個(gè)稀釋度復(fù)孔2～3個(gè)。對(duì)照孔只加0.1ml培養(yǎng)液。
2)用細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌CCL-185細(xì)胞后，將細(xì)胞配成1×105/ml懸液。每孔加0.1ml細(xì)胞懸液，置37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16小時(shí)。
3)每孔加0.5μCi(18.5kBq)[3H]脫氧胸苷，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)。
4)用多頭細(xì)胞收集器將細(xì)胞收集到玻璃纖維濾紙上，在液體閃爍儀上計(jì)數(shù)細(xì)胞攝入的同位素活性，用cpm值對(duì)樣品稀釋倍數(shù)作圖。在圖上，標(biāo)準(zhǔn)IL-4的曲線與待測(cè)樣品的曲線應(yīng)當(dāng)呈平行的S型。比較同樣cpm處的不同稀釋倍數(shù)，決定待測(cè)樣品的相應(yīng)濃度。
3)用B細(xì)胞增殖反應(yīng)檢測(cè)IL-4
1.制備部分純化的B細(xì)胞：取BALB/c或C57BL/6小鼠，無菌分離脾細(xì)胞。去除粘附細(xì)胞和T細(xì)胞，分離部分純化的B細(xì)胞。洗滌細(xì)胞后，用細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞配成1×106～2×106/ml。
2.確定抗IgM抗體的亞適劑量
1)取96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加0.1ml B細(xì)胞懸液，加0.5U重組IL-4。
2)用細(xì)胞培養(yǎng)液系列稀釋抗IgM抗體，每孔加0.1ml稀釋液。每個(gè)稀釋度設(shè)2～3個(gè)復(fù)孔。對(duì)照孔只加細(xì)胞培養(yǎng)液。
3)置37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48～72小時(shí)。用[3H]脫氧胸苷摻入法或MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖率。與對(duì)照相比，取加入IL-4后能引起明顯細(xì)胞增殖的zui低或接近zui低的抗IgM抗體的稀釋度為亞適劑量。
3.協(xié)同刺激實(shí)驗(yàn)
1)取96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加0.1ml B細(xì)胞懸液和0.05ml亞適劑量的抗IgM抗體。
2)用細(xì)胞培養(yǎng)液系列稀釋IL-4標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品，每孔加0.05ml稀釋液。每個(gè)稀釋度設(shè)2～3個(gè)復(fù)孔。對(duì)照孔只加細(xì)胞培養(yǎng)液。
3)置37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48～72小時(shí)。用[3H]脫氧胸苷摻入法或MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖率。
IL-4生物活性的檢測(cè)方法包括了人外周血淋巴細(xì)胞檢測(cè)、抑制細(xì)胞增殖的活性檢測(cè)和B細(xì)胞增殖反應(yīng)，另外由IL-4介導(dǎo)還能使腫瘤本身cathepsin B和cathepsin S活性增強(qiáng)，已成為的研究熱點(diǎn)之一。