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上海士鋒生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

如何進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)常用方法

時(shí)間:2014/9/25閱讀:694
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根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞的類型,可采用貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)等三種培養(yǎng)方法進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)。 

一、動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)特性及培養(yǎng)溫度  
      1.細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,易污染,培養(yǎng)需用抗生素  
      2.細(xì)胞大,無(wú)細(xì)胞壁,機(jī)械強(qiáng)度低,環(huán)境適應(yīng)性差  
      3.需氧少,不耐受強(qiáng)力通風(fēng)與攪拌  
      4.群體生應(yīng),貼壁生長(zhǎng)(錨地依賴性)  
      5.培養(yǎng)過(guò)程產(chǎn)品分布細(xì)胞內(nèi)外,成本高  
      6.原代培養(yǎng)細(xì)胞一般繁殖50代即退化死亡 

依據(jù)在體外培養(yǎng)時(shí)對(duì)生長(zhǎng)基質(zhì)依賴性差異,動(dòng)物細(xì)胞可分為兩類: 
      貼壁依賴型細(xì)胞:需要附著于帶適量電荷的固體或半固體表面才能生長(zhǎng),大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞,包括非淋巴組織細(xì)胞和許多異倍體細(xì)胞均屬于這一類。  
      非貼壁依賴型細(xì)胞:無(wú)需附著于固相表面即可生長(zhǎng),包括血液、淋巴組織細(xì)胞、許多腫瘤細(xì)胞及某些轉(zhuǎn)化細(xì)胞。 

培養(yǎng)細(xì)胞的zui適溫度相當(dāng)于各種細(xì)胞或組織取材機(jī)體的正常溫度。人和哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的zui適溫度為35~37℃。偏離這一溫度,細(xì)胞正常的代謝和生長(zhǎng)將會(huì)受到影響,甚至死亡??偟膩?lái)說(shuō),培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)低溫的耐力比高溫高。溫度不超過(guò)39℃時(shí),細(xì)胞代謝強(qiáng)度與溫度成正比;細(xì)胞培養(yǎng)置于39~40℃環(huán)境中1h,即受到一定損傷,但仍能恢復(fù);當(dāng)溫度達(dá)43℃以上時(shí),許多細(xì)胞將死亡。當(dāng)溫度下降到30~20℃時(shí),細(xì)胞代謝降低,因而與培養(yǎng)基之間物質(zhì)交換減少。首先看到的是細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變以及細(xì)胞從基質(zhì)上脫落下來(lái)。當(dāng)培養(yǎng)物恢復(fù)到初始的培養(yǎng)溫度時(shí),它們?cè)械男螒B(tài)和代謝也隨之恢復(fù)到原有水平。 

二、貼壁培養(yǎng)(attachment culture)是指細(xì)胞貼附在一定的固相表面進(jìn)行的培養(yǎng)。 

1.生長(zhǎng)特性:貼壁依賴型細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)要貼附于培養(yǎng)(瓶)器皿壁上,細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展,然后開(kāi)始有絲分裂,并很快進(jìn)入對(duì)數(shù)生。一般數(shù)天后就鋪滿培養(yǎng)表面,并形成致密的細(xì)胞單層。 

2.貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):  
      容易更換培養(yǎng)液;細(xì)胞緊密黏附于固相表面,可直接傾去舊培養(yǎng)液,清洗后直接加入新培養(yǎng)液。  
      容易采用灌注培養(yǎng),從而達(dá)到提高細(xì)胞密度的目的;因細(xì)胞固定表面,不需過(guò)濾系統(tǒng)。  
      當(dāng)細(xì)胞貼壁于生長(zhǎng)基質(zhì)時(shí),很多細(xì)胞將更有效的表達(dá)一種產(chǎn)品。  
      同一設(shè)備可采用不同的培養(yǎng)液/細(xì)胞的比例。  
      適用于所有類型細(xì)胞。 

3.貼壁培養(yǎng)的缺點(diǎn):與懸浮培養(yǎng)法相比  
      擴(kuò)大培養(yǎng)比較困難,投資大;  
      占地面積大;  
      不能有效監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng);  

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