藥敏紙片說明書（擴散法<K-B>法）
【產品名稱】通用名稱：藥敏紙片（擴散法<K-B法>）
【包裝規(guī)格】20片/瓶
【預期用途】用于用于高等院校、科研機構等科研使用（抗微生物藥物敏感性試驗）。
【檢驗原理】藥敏試紙含帶的藥物經溶解向培養(yǎng)基周圍擴散，形成同心圓濃度梯度，在一定濃度范圍內
可抑制敏感菌的生長，形成抑菌環(huán)。該抑菌環(huán)直徑的大小與該抗菌藥物的低抑菌濃度（MIC）成反比。即通過紙片擴散試驗所測的抑菌環(huán)直徑的大小，并參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》或CLSI《抗菌藥物敏感性試驗執(zhí)行標準》判斷檢測菌敏感、中介或耐藥情況。
【主要組成成份】直徑為6.0~6.35mm的藥檢紙，含微量抗生素稀釋液。
【儲存條件及有效期】-20~8°C保存，避光密封貯存，有效期為十二個月。
【樣本要求】待測菌應為生長在無選擇性瓊脂平板上的新鮮純菌落。
【檢驗方法】 a 冰箱內取出的試紙瓶需放置恒溫后方可打開，防止冷熱水凝結造成紙片受潮。
b 用接種環(huán)挑取18~24h培養(yǎng)的新鮮菌落于3~10ml無菌用水內，調制成相當于 0.5麥氏
標準的細菌濃度（務必于15min內使用）
c 用無菌棉拭子沾取菌液，并經管壁旋轉擠壓去除過多的菌液，均勻涂抹于MH培養(yǎng)基表
面（培養(yǎng)基厚度約為4mm），以不同角度涂抹3次，然后沿平皿內緣涂抹一周，蓋上皿
蓋，置室溫干燥3~5min后用鑷子將藥敏試紙貼于培養(yǎng)基面上（9cm的平皿可貼6片）。
紙片貼牢后避免再次移動。
d 蓋上蓋子，倒扣置培養(yǎng)箱內孵育（一般為18~24h）后取出。
e 用游標卡尺量取抑菌環(huán)直徑，對照判讀標準判讀結果。
【檢驗結果的解釋】
敏感（S）：是指菌株能被常規(guī)劑量在感染部位可達到的抗菌濃度所抑制。
中介（I）：常規(guī)劑量在感染部位可達到的濃度，不是敏感性的度量；還可作為
緩沖區(qū)，為防止有微小技術因素失控導致的結果偏差。
耐藥（R）：是指菌株不能被常規(guī)劑量在感染部位可達到的抗菌濃度所抑制。
【檢驗方法的局限性】僅用于科研標本的藥物敏感性試驗。
【產品性能指標】
外觀：微生物藥敏試紙的包裝應整潔，標簽圖案與文字清晰無誤；藥敏紙片呈圓形，邊緣無缺口，表面平滑，無裂痕；紙片兩邊均有抗菌藥物的名稱縮寫和表示含量的縮寫。紙片直徑：藥敏紙片直徑應為：6.0mm～6.35mm
抑菌環(huán)直徑：用相應的質控菌進行紙片擴散法試驗，95%結果應符合該質控菌的可接受范圍。
（結果參照附表 A）
批內重復性：同批同型號的藥敏試紙其抑菌環(huán)直徑大值與小值之差≤2mm。
批間重復性：三批同型號的藥敏試紙，對同一質控菌進行抑菌試驗，同一平板上抑菌環(huán)大值和小值直徑之差的平均數(shù)不大于 4mm。
【注意事項】1冰箱內取出試紙瓶需放置恒溫后方可打開，防止冷熱水凝結使紙片受潮。
2藥敏試驗采用水解酪蛋白（MH）瓊脂，4mm厚度，PH7.2~7.4；對營養(yǎng)要求
高的細菌需另補充微量因子。建議挑取3~5個菌落調制菌液。
3平皿使用時應盡可能除去多余的水份，以免影響抑菌環(huán)的擴散。
4培養(yǎng)溫度應控制在35~37°C，堆放平皿不易過高影響受熱均勻。
5測量抑菌環(huán)應該仔細，。
6使用后的所有培養(yǎng)物須高壓滅菌處理。
【參考文獻】<<全國臨床檢驗操作規(guī)程>> 及CLSI<<抗菌藥物敏感性試驗執(zhí)行標準>>2013版
科研實驗，不用于臨床診斷
附表:微生物藥敏紙片（擴散法<K-B 法>）的組成、代號/含量、抑菌環(huán)解釋標準、質控菌抑菌環(huán)允許范圍
編號 | 組成 | 代號/含量 <μ g> | 抑菌環(huán)解釋標準 | 質控菌抑菌環(huán)允許范圍 |
R I S | 大腸艾希菌 ATCC25922 |
ATCC25923 | 銅綠假單胞菌 ATCC27853 | 大腸艾希菌 ATCC35218 |
1 |
| CTX30 | ≤14 15～22 ≥23 | 29～35 | 25～31 | 18～22 | — |
2 |
| CRO30 | ≤13 14～20 ≥21 | 29～35 | 22～28 | 17～23 | — |
3 |
| CFP75 | ≤15 16～20 ≥21 | 28～34 | 24～33 | 23～29 | — |
4 |
| CAZ30 | ≤14 15～17 ≥18 | 25～32 | 16～20 | 22～29 | — |
5 |
| CXM30 | ≤14 15～17 ≥18 | 20～26 | 27～35 | — | — |
6 |
| CZ30 | ≤14 15～17 ≥18 | 21～27 | 29～35 | — | — |
7 |
| CFX30 | ≤14 15～17 ≥18 | 23～29 | 23～29 | — | — |
8 | 頭孢吡肟 | FEP30 | ≤14 15～17 ≥18 | 31～37 | 23～29 | 24～30 | — |
9 |
| PIP100 | 假單胞菌屬 ≤17 ≥18 | 24～30 | — | 25～33 | 12～18 |
其他G-桿菌 ≤17 18～20 ≥21 |
10 | 苯唑西林 | OX1 | 金葡/里昂球菌 ≤10 11～12 ≥13 | — | 18～24 | — | — |
凝固酶-葡萄球菌 ≤17 ≥18 |
11 |
| AM10 | 腸桿菌 ≤13 14～16 ≥17 | 16～22 | 27～35 | — | 6 |
葡萄球菌 ≤28 ≥29 |
腸球菌 ≤16 ≥17 |
12 |
| CB100 | 假單胞菌屬 ≤13 14～16 ≥17 | 23～29 | — | 18～24 | — |
其他G-桿菌 ≤19 20～22 ≥23 |
13 |
| TIC75 | 假單胞菌屬 ≤14 ≥15 | 24～30 | — | 21～27 | 6 |
其他G-桿菌 ≤14 15～19 ≥20 |
14 | 左氟沙星 | LVF5 | ≤13 14～16 ≥17 | 29～37 | 25～30 | 19～26 | — |
15 |
| CIP5 | ≤15 16～20 ≥21 | 30～40 | 22～30 | 25～33 | — |
16 |
| OFL5 | ≤12 13～15 ≥16 | 29～33 | 24～28 | 17～21 | — |
17 |
| LMF10 | ≤18 19～21 ≥22 | 27～33 | 23～29 | 22～28 | — |
18 |
| GTF5 | ≤14 15～17 ≥18 | 30～37 | 27～33 | 20～28 | — |
19 |
| FLE5 | ≤15 16～18 ≥19 | 28～34 | 21～27 | 12～20 | — |
20 |
| 0 | ≤12 13～16 ≥17 | 28～35 | 17～28 | 22～29 | — |
21 |
| GM10 | ≤12 13～14 ≥15 | 19～26 | 19～27 | 16～21 | — |
22 |
| SPF5 | ≤15 16～18 ≥19 | 30～38 | 27～33 | 21～29 | — |
23 |
| DOX30 | ≤12 13～15 ≥16 | 18～24 | 23～29 | — | — |
24 | 米諾環(huán)素 | MNO30 | ≤14 15～18 ≥19 | 19～25 | 25～30 | — | — |
25 |
| CLA15 | ≤13 14～17 ≥18 | — | 26～32 | — | — |
26 |
| VA30 | 若≤14 需測 MIC≥15 | — | 17～21 | — | — |
27 |
| AZI15 | ≤13 14～17 ≥18 | — | 21～26 | — | — |
28 |
| K30 | ≤13 14～17 ≥18 | 17～25 | 19～26 | — | — |
29 |
| CM2 | ≤14 15～20 ≥21 | — | 24～30 | — | — |
30 |
| E15 | ≤13 14～22 ≥23 | — | 22～30 | — | — |
31 |
| P10U | 葡萄球菌 ≤28 ≥29 | — | 26～37 | — | — |
腸球菌 ≤14 ≥15 |
32 |
| C30 | ≤12 13～17 ≥18 | 21～27 | 19～26 | — | — |
注：1 編號 39 /棒酸比抑菌環(huán)直徑≥5mm 和/或編號 40 /棒酸比抑菌環(huán)直徑≥3mm， 判定為產 ESBLs 。 2編號 56 用于鑒別葡萄球菌屬，抑菌環(huán)在 15～25mm 提示。 3編號 57 新生霉素 用于葡萄菌屬內鑒定，ATCC25923 做陰性對照（≥16mm 敏感），抑菌環(huán)≤16mm為陽性（耐藥） 和表皮葡萄球菌可被抑制，表現(xiàn)為敏感，而腐生葡萄球菌則表現(xiàn)為耐藥。 4編號 58 用于鏈球菌屬內鑒定 形成抑菌環(huán)為敏感，則推斷被檢菌為A 群鏈球菌。 5編號 59 奧撲托新 用于鏈球菌屬內鑒定 抑菌環(huán)＞14mm 為敏感，推斷為肺炎鏈球菌。 6編號 60 質控允許范圍用糞腸球菌ATCC29212，抑菌環(huán) 16～23mm 為合格。 |
編號 | 組成 | 代號/含量 <μ g> | 抑菌環(huán)解釋標準 | 質控菌抑菌環(huán)允許范圍 |
R | I | S | | 大腸艾希菌 ATCC25922 |
ATCC25923 | 銅綠假單胞菌 ATCC27853 | 大腸艾希菌 ATCC35218 |
33 |
| FOS200 | ≤12 | 13～15 | ≥16 | | 22～30 | 25～33 | — | — |
34 |
| S10 | ≤11 | 12～14 | ≥15 | | 12～20 | 14～22 | — | — |
35 | 四環(huán)素 | TC30 | ≤14 | 15～18 | ≥19 | | 18～25 | 24～30 | — | — |
36 |
| RA5 | ≤16 | 17～19 | ≥20 | | 8～10 | 26～34 | — | — |
37 | / 棒酸 | AMC20/10 | ≤19 | 葡萄球菌 | ≥20 | | 18～24 | 28～36 | — | 17～22 |
≤13 | 其他 14～17 | ≥18 | |
38 | / 棒酸 | TCA75/10 | ≤14 | 假單胞菌 | ≥15 | | 24～30 | 29～37 | 20～28 | 21～25 |
其他G-桿菌 ≤14 15～19 ≥20 |
≤22 | 葡萄球菌 | ≥23 | |
39 | / 棒酸 | CAC 30/10 | — | 25～32 | 16～20 | 22～29 | — |
40 | / 棒酸 | CTC30/10 | — | 29～35 | 25～31 | 18～22 | — |
41 | / 舒巴坦 | SCF75/30 | ≤15 | 16～20 | ≥21 | | 28～34 | 24～33 | 23～29 | — |
42 | / 舒巴坦 | AMS10/10 | ≤11 | 12～14 | ≥15 | | 19～24 | 29～37 | — | 13～19 |
43 | / | PIT100/10 | ≤17 | 假單胞菌 | ≥18 | | 24～30 | 27～36 | 25～33 | 24～30 |
其他G-桿菌 ≤17 18～20 ≥21 |
≤17 | 葡萄球菌 | ≥18 | |
44 | / 磺胺甲惡唑 | SXT25 | ≤10 | 11～15 | ≥16 | | 23～29 | 24～32 | — | — |
45 | 丁胺卡那 | AN30 | ≤14 | 15～16 | ≥17 | | 19～26 | 20～26 | 18～26 | — |
46 |
| FT300 | ≤14 | 15～16 | ≥17 | | 20～25 | 18～22 | — | — |
47 |
| AZT30 | ≤15 | 16～21 | ≥22 | | 28～36 | — | 23～29 | — |
48 |
| IPN10 | ≤13 | 14～15 | ≥16 | | 26～32 | — | 20～28 | — |
49 |
| MPN10 | ≤13 | 14～15 | ≥16 | | 28～34 | 29～37 | 27～33 | — |
50 |
| TM10 | ≤12 | 13～14 | ≥15 | | 18～26 | 19～29 | 19～25 | — |
51 | 奈替米星 | NET30 | ≤12 | 13～14 | ≥15 | | 22～30 | 22～31 | 17～23 | — |
52 |
| CTZ30 | ≤14 | 15～19 | ≥20 | | 30～36 | 27～35 | 12～17 | — |
53 | 頭 | CF30 | ≤14 | 15～17 | ≥18 | | 15～21 | 29～37 | — | — |
54 | 替拉寧 | TCL30 | ≤10 | 11～13 | ≥14 | | — | 15～21 | — | — |
55 |
| TMP5 | ≤10 | 11～15 | ≥16 | | 21～28 | 19～26 | — | — |
56 |
| FZ100 | — | — | 15～25 | — | — |
57 | 新生霉素 | NB5 | — | — | ≥16 | — | — |
58 |
| B0.04 | | | | 化膿性鏈球菌 ATCC19615 | 形成抑菌環(huán) | |
59 | 奧撲托新 | EPR5 | 肺炎鏈球菌 ATCC49619 抑菌環(huán)＞14mm |
60 |
| GM120 | 糞腸球菌 ATCC29212 抑菌環(huán)：16～23mm |
