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上海士鋒生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

士鋒微量DNA的純化

時(shí)間:2015-10-15閱讀:681
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1.對(duì)于微量DNA樣品溶液(如100ml以下),應(yīng)預(yù)先將DNA溶液以TE或無(wú)菌水稀釋至一定體積。以減少第5步中的DNA損失。2.加入等體積的酚:氯仿:異戊醇[1](25:24:1)。3.劇烈振蕩管中內(nèi)容物,將水相和有機(jī)相充分混勻,使之成為乳濁液。4.室溫下靜置以初步分層。再用離心機(jī)于室溫以10000rpm離心至少5分鐘以上,使無(wú)機(jī)相與有機(jī)相充分分開。5.用剪去尖頭的微量移液器槍頭[2]小心移出水相于一干凈離心管中(不要擾動(dòng)界面上的蛋白質(zhì)層),棄去有機(jī)相、兩相界面層及接近兩相界面層的水相。6. 重復(fù)步驟2-5直至兩相界面上看不到蛋白質(zhì)層。7..加入等體積的氯仿并重復(fù)步驟2-5。8.加入1/10體積乙酸鈉(3.0mol/L,pH 5.2),再加入等體積的異丙醇,顛倒混勻。9.用離心機(jī)于室溫以10000rpm離心10分鐘使核酸沉淀[3]。傾掉上清液。10.加入1/2離心管體積的75%乙醇洗滌DNA沉淀[4]10分鐘。11.10000rpm離心2分鐘。使DNA沉淀緊貼管底。12.傾掉上清液,將離心管倒置于紙巾上使殘留液體揮發(fā)至干。13.用適當(dāng)體積的TE(pH8.0)緩沖液溶解DNA沉淀,用緩沖液充分洗管壁。-20℃貯藏。 [1]任何含有或/和氯仿的試劑都應(yīng)使用巴斯德吸管或玻璃滴管,切忌使用微量移液器,因和氯仿(尤其是后者)都對(duì)微量移液器具有強(qiáng)腐蝕性。[2]使用剪去尖頭的微量移液器槍頭以避免水流攪動(dòng)界面。[3]純化良好的DNA沉淀于離心管底,無(wú)色透明,肉眼不可見(jiàn)。[4]只需浸泡靜置,不用將DNA沉淀重新懸浮。

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