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血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳

時間:2014-4-25閱讀:1463
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瓊脂糖(agarose)是經(jīng)過挑選,以質(zhì)地較純的瓊脂(agar)作為原料而制成的。瓊脂在化學(xué)上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復(fù)合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖,它具有離子交換性質(zhì),這種性質(zhì)會給電泳及凝膠過濾以不良的影響。瓊脂糖是直鏈多糖,它由D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖的殘基交替排列組成。 

瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠。電泳時因凝膠含水量大(98-99%),近似自由電泳,因為固體支持物的影響少,故電泳速度快,區(qū)帶整齊。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團(tuán),電滲影響很少,是一種較好的電泳材料,分離效果較好。 

血清中脂類物質(zhì)與血清載脂蛋白結(jié)合成水溶性的脂蛋白(lipoprotein)形式存在。各種脂蛋白中所含載脂蛋白的種類及數(shù)量不同,各種脂蛋白顆粒大小也相差很大,因此,以瓊脂糖凝膠為支持物,在電場中可使各種脂蛋白顆粒分離開來。 

血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳  血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳

瓊脂糖凝膠電泳分離血清蛋白方法簡單。將血清脂蛋白用脂類染料蘇丹黑(或油紅等)進(jìn)行預(yù)染。再將預(yù)染過的血清加樣于瓊脂糖凝膠板加樣槽中,通電后可以看到脂蛋白向正極移動,并分離出幾個區(qū)帶。 
正常人血清脂蛋白可出現(xiàn)三條區(qū)帶,從陰極到陽極依次為β-脂蛋白(zui深),前β-脂蛋白(zui淺)及α-脂蛋白(比前β-脂蛋白略深些),在原點處應(yīng)無乳糜微粒。有時前β-脂蛋白也顯
示不出來。

瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠。電泳時因凝膠含水量大(98-99%),近似自由電泳,因為固體支持物的影響少,故電泳速度快,區(qū)帶整齊。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團(tuán),電滲影響很少,是一種較好的電泳材料,分離效果較好。

血清中脂類物質(zhì)與血清載脂蛋白結(jié)合成水溶性的脂蛋白(lipoprotein)形式存在。各種脂蛋白中所含載脂蛋白的種類及數(shù)量不同,各種脂蛋白顆粒大小也相差很大,因此,以瓊脂糖凝膠為支持物,在電場中可使各種脂蛋白顆粒分離開來。

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