一 開機(jī)前檢查:
1 檢查儀器臺(tái)面(DECK)上所有的實(shí)驗(yàn)材料(Labware)。
2 檢查SystemWater 水桶的水位。
3 檢查恒溫循環(huán)水浴(Chiller)水箱的水位,并定期更換或填充Chiller 中的循環(huán)水。
4 倒掉廢液桶中的廢液。
二 開機(jī)步驟:
打開Chiller、Heater、儀器及計(jì)算機(jī)電源,進(jìn)入WinPREP程序 :
1 儀器初始化
點(diǎn)擊菜單:[Utilites]→[Setup]→[Instrument]→[Initialize]儀器進(jìn)行初始化。
2 系統(tǒng)管路沖洗、除氣泡
點(diǎn)擊菜單:[Utilites]→[Diagnostics Test]→[Flush and Wash tips];
放置Labware(washbowl+1Through)在儀器平臺(tái)的G13位置,排液管接至廢液桶,按提示執(zhí)行程序:
Deck layout OK,
run test now。 √
Flush Wash Volumes
Enter the Flush Volume(vl): 3000
Enter the Wash Volume(vl) : 3000
>start,儀器開始沖洗管路中的氣泡,要多次沖洗直至管中*沒有氣泡。
3 執(zhí)行自動(dòng)酶切程序
點(diǎn)擊菜單:[File]→[Open];
打開所要執(zhí)行的自動(dòng)酶切操作文件:
按文件圖示位置放置所需的Labware。(注意:蓋子應(yīng)放在96 well ABGENE PCR 上; 所有實(shí)驗(yàn)器皿應(yīng)放入準(zhǔn)確位置), 按要求配置試劑,裝入試劑盒(瓶);
點(diǎn)擊工具欄:[Execute Test]。彈出[Test Startup page]窗口, →點(diǎn)擊[Reset Tip Boxes],(Lid on PCR(1-96) ,Tips=1),“Fill”為添滿,“Empty”為清空,
Name Based on file Location New/Used
Lid on gel(1-96) Lid( on gel).rak G16 0/0
Lid on gel(97-192) Lid( on gel).rak E16 0/0
Lid on PCR(1-96) Lid( on PCR).rak C10 1/0
Lid on PCR(97-192) Lid( on PCR).rak A10 0/0
Lid on rest(1-96) Lid( on rest).rak C07 0/0
Lid on rest(97-192) Lid( on rest).rak A07 0/0
TiPS 1-96 20vl MBP disposable tips.rak C13 96/0
Tips 97-192 20vl MBP disposable tips.rak A13 96/0
Tips for li… 200vl MBP disposable tips.rak C16 96/0
>OK
>Next
Heater Control Options
Manual Control
Black Box Pow-R-Switch
Packard Automated Heater Control √
>Next
Sample information
How many Coomassie-stained sample? (以8為單位輸入你的樣品數(shù))
Position of first Coomassie-stained sample? 1
How many Silver-stained sample? (不做銀染可忽略)
Position of first Silver-stained sample? (不做銀染可忽略)
>Next
Method Options
Remove excess liquid? √
Include Coomassie de-stain? √
Include silver de-stain?
Include reduction and alkylation? √
Include wash-dehydrate steps? √
Number of extractions? 2
Dispose of used 20µl tips? √
>Next
MALDI Options
Used Lockmass?
Spot MALDI target? √
Spot target twice? √
On-target washing?
>Start,開始執(zhí)行程序。
注意事項(xiàng):
1. 為避免角蛋白和其它污染,在移動(dòng)labware 、dispensable tips、試劑或樣品時(shí),請(qǐng)戴手套操作,在儀器運(yùn)行過程中非儀器操作人員請(qǐng)遠(yuǎn)離儀器。
2. 整個(gè)操作過程中的水為除去氣泡的去離子水。
3. 檢查冷卻循環(huán)儀是否打開和是否達(dá)到安全水位;檢查系統(tǒng)液體的水平面是否達(dá)到標(biāo)志線(1/2桶的體積);檢查廢水桶的液面,及時(shí)排水;檢查各種實(shí)際是否準(zhǔn)確配置及正確放入位置。
4. 執(zhí)行程序前,一定要對(duì)照所選執(zhí)行程序檢查所有Labware的位置是否正確
5. 蓋子(lid)應(yīng)放在96 well ABgene PCR (1-96)上。
6. 運(yùn)行FlushLiq ,盡可能的去除系統(tǒng)中可能存在的氣泡。
7. 在[Reset Tip Boxes]時(shí),要確定蓋子(lid)位置和槍頭(Tips)數(shù)量與實(shí)際位置和數(shù)量相符
8. 在儀器運(yùn)行過程中如有以外情況發(fā)生,請(qǐng)速按儀器正前方緊急停止按扭(紅色)。
9. 在儀器關(guān)機(jī)不用時(shí),請(qǐng)用儀器罩遮嚴(yán)以防止灰塵。
10. 在每次操作完成后請(qǐng)自覺登記,并保證操作臺(tái)面的整潔。