選擇BLOCK-iT™ Dicer RNAi試劑盒,利用RNA干擾技術(shù)(RNA interference,RNAi)進(jìn)行簡(jiǎn)單、快速的基因阻斷,您不必再花費(fèi)時(shí)間設(shè)計(jì)siRNA oligo序列及檢測(cè)它們的效率,就可直接獲得RANi結(jié)果。
功能基因阻斷研究的簡(jiǎn)單、快速的方法
RNA干擾(RNAi)正在成為一種的技術(shù)之一,用于在功能分析試驗(yàn)中有效地阻斷特異基因的表達(dá)。通過這種方法,利用長(zhǎng)度為21-23個(gè)核苷酸的小干擾RNA(sirna)可以很容易地、特異地降解互補(bǔ)靶mRNA。
當(dāng)前常用的用來在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中啟動(dòng)RNAi反應(yīng)的方法包括以下幾種:轉(zhuǎn)染合成的siRNA寡核苷酸(siRNAoligonucleocides),體外轉(zhuǎn)錄后通過Dicer酶將長(zhǎng)的雙鏈RNA(dsRNA)切割成Diced siRNA (d-siRNA),或者導(dǎo)入能夠表達(dá)siRNA的載體。在這些方法中,只有體外轉(zhuǎn)錄和切割(Dicing)能夠形成d-siRNA 雙鏈體的復(fù)雜池,繼而經(jīng)過轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞。這一過程可以很快產(chǎn)生結(jié)果,而無需再花費(fèi)時(shí)間設(shè)計(jì)和檢測(cè)多個(gè)序列,并確定哪一個(gè)將會(huì)導(dǎo)致顯著的基因表達(dá)阻斷。現(xiàn)在您可以通過BLOCK-iT™ Dicer RNAi 轉(zhuǎn)染和BLOCK-iT™ Dicer RNAi TOPO®轉(zhuǎn)錄試劑盒簡(jiǎn)便、快速的獲得所需要的RNAi的原始數(shù)據(jù),方便地研究和選擇模式系統(tǒng)中的目的基因。
BLOCK-iT™ Dicer試劑盒作用原理
BLOCK-iT™ Dicer反應(yīng)的*步是構(gòu)建dsRNA模板。您可以通過BLOCK-iT™ Dicer RNAi TOPO®轉(zhuǎn)錄試劑盒(包括在BLOCK-iT™ complete Dicer RNAi試劑盒中)很容易地得到轉(zhuǎn)錄本,而且轉(zhuǎn)錄本產(chǎn)量大,純度高,能夠直接用來作為BLOCK-iT™ Dicer反應(yīng)的底物,用高活性的Dicer酶消化后,使用試劑盒中提供的柱子快速純化zui終的d-siRNA,就可獲得高純度的d-siRNA庫(kù),并可以使用有口皆碑的Lipofectamine™ 2000轉(zhuǎn)染試劑將它導(dǎo)入細(xì)胞。
