. 實驗目的
1. 掌握DNA指紋圖譜技術的概念、原理和基本操作過程
2. 學習DNA的限制性酶切的基本技術
3. 掌握瓊脂糖凝膠電泳的基本操作技術,學習利用瓊脂糖凝膠電泳測定DNA段的長度,并能對實驗結果進行分析。
二. 實驗原理
1984年英國萊斯特大學的遺傳學家Jefferys及其合作者將分離的人源小衛(wèi)星DNA用作基因探針,同人體核DNA的酶切片段雜交,獲得了<img alt="DNA指紋圖譜分析[DNA Fingerprinting ]" dna指紋圖譜分析[dna="" fingerprinting="" ]"="" height="269" data-cke-saved-src="http://img100.bio1000.com/2012/0508/095250/546.gif" src="http://img100.bio1000.com/2012/0508/095250/546.gif" width="398" align="left" border="0" style="vertical-align: middle; border: 0px;">由多個位點上的等位基因組成的長度不等的雜交帶圖紋,這種圖紋極少有兩個人*相同,故稱為"DNA指紋",意思是它同人的指紋一樣是每個人所*的。DNA指紋的圖像在X光膠片中呈一系列條紋,很像商品上的條形碼。DNA指紋圖譜,開創(chuàng)了檢測DNA多態(tài)性(生物的不同個體或不同種群在DNA結構上存在著差異)的多種多樣的手段,如RFLP(限制性內切酶酶切片段長度多態(tài)性)分析、串聯(lián)重復序列分析、RAPD(隨機擴增多態(tài)性DNA)分析等等。各種分析方法均以DNA的多態(tài)性為基礎,產生具有高度個體特異性的DNA指紋圖譜,由于DNA指紋圖譜具有高度的變異性和穩(wěn)定的遺傳性,且仍按簡單的孟德爾方式遺傳,成為目前吸引力的遺傳標記。
DNA指紋具有下述特點:1.高度的特異性:研究表明,兩個隨機個體具有相同DNA圖形的概率僅3×10-11;如果同時用兩種探針進行比較,兩個個體*相同的概率小于5×10-19。*人口約50億,即5×109。因此,除非是同卵雙生子女,否則幾乎不可能有兩個人的DNA指紋的圖形*相同。2.穩(wěn)定的遺傳性:DNA是人的遺傳物質,其特征是由父母遺傳的。分析發(fā)現(xiàn),DNA指紋圖譜中幾乎每一條帶紋都能在其雙親之一的圖譜中找到,這種帶紋符合經典的孟德爾遺傳規(guī)律,即雙方的特征平均傳遞50%給子代。3.體細胞穩(wěn)定性:即同一個人的不同組織如血液、肌肉、毛發(fā)、等產生的DNA指紋圖形*一致。