細(xì)胞培養(yǎng)中無菌操作技術(shù)

上海隆壘分享細(xì)胞培養(yǎng)中的無菌技術(shù)：

        1. 實驗進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺（laminar flow） 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個細(xì)胞株的操作。

        2. 無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在臺面的*無菌區(qū)域，勿在邊緣的非無菌區(qū)域操作。

        3. 小心取用無菌的實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45° 角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

        4. 工作人員應(yīng)注意自身的安全，須穿戴實驗衣及手套后才進(jìn)行實驗。對于來自人類或是病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺（至少Class II）。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol 的產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖銳針頭的傷害等。

        5. 定期檢測下列項目：

5.1. CO2 鋼瓶的CO2 壓力

5.2. CO2 培養(yǎng)箱的CO2 濃度、溫度、及水盤是否有污染（水盤的水用無菌水，每周更換）。

5.3. 無菌操作臺內(nèi)的airflow 壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時/預(yù)濾網(wǎng)，3000 小時/HEPA）。

        6. 水槽可添加消毒劑（Zephrin 1:750），定期更換水槽的水。

上海隆壘生物科技有限公司是一家技術(shù)服務(wù)型渠道企業(yè),在行業(yè)發(fā)展中所承擔(dān)的角色是一種溝通產(chǎn)出方和需求方(科研和市場)的媒介，我們致力為行業(yè)人才提供了包括科研在內(nèi)的更多出口，為科研提供了有力的硬件支持，有效地促進(jìn)科研和市場需求結(jié)合，提高了科研成果的轉(zhuǎn)化效率，使得科研更具活力。