大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）ELISA試劑盒
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）水平。用純化的大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入α顆粒膜蛋白（GMP-140），再與HRP標(biāo)記的α顆粒膜蛋白（GMP-140）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α顆粒膜蛋白（GMP-140）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）濃度。
大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）ELISA試劑盒
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
| 20μg/L | 5號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 10μg/L | 4號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 5μg/L | 3號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 2.5μg/L | 2號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 1.25μg/L | 1號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
大鼠α顆粒膜蛋白（GMP-140）ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：
Anti-CTn1（Cardiac troponin 1） 心肌肌鈣蛋白抗體
Anti-CT-1/CTF1（Cardiotrophln 1） 心肌營養(yǎng)素1抗體
Anti-CA I（Carbonic anhydrase I） 碳酸酐酶1抗體
Anti-CTNNAL1（catenin（cadherin-associated protein）alpha-like1） 粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體
Anti-CA Ⅱ（Carbonic anhydrase Ⅱ） 碳酸酐酶2抗體
Anti-CAS （Cellular Apoptosis Susceptibility） 細(xì)胞凋亡敏感性基因
Anti-Caspase-1 （ICE/CASP-1/P45） 天冬氨酸-*特異性蛋白酶家族抗體
Anti-Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10抗體
Anti-Caspase-12（rat mouse） 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體（大、小鼠）
Anti-Caspase-12（hunman） 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體（人）
Anti-Caspase-13 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體
Anti- Caspase-3（Active）/caspase-3 p17 subunit 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體
Anti-caspase-3 p12 subunit 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體
Anti-procaspase 3 半胱天冬酶-3酶原抗體
Anti-CASP4（Caspase-4） 半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體
Anti-Caspase-6 （CT） 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體（C端）
Anti-Caspase-6 （NT） 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體（N端）
Anti-Caspase-6 （NT）mouse 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體（N端）
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