大鼠白細胞介素4（IL-4）ELISA試劑盒
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠白細胞介素4（IL-4）水平。用純化的大鼠白細胞介素4（IL-4）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素4（IL-4），再與HRP標記的白細胞介素4（IL-4）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素4（IL-4）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠白細胞介素4（IL-4）濃度。
試劑盒組成
| 1 | 20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 3ml×1瓶 |
| 2 | 酶標試劑 | 3ml×1瓶 | 8 | 標準品（240pg/ml） | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶標包被板 | 12孔×4條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 樣品稀釋液 | 3ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
| 5 | 顯色劑A液 | 3ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
| 6 | 顯色劑B液 | 3ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
大鼠白細胞介素4（IL-4）ELISA試劑盒
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
| 120pg/ml | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 60pg/ml | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 30pg/ml | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 15pg/ml | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
| 7.5pg/ml | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
大鼠白細胞介素4（IL-4）ELISA試劑盒部分推薦產(chǎn)品：
人組織蛋白酶抗體（Cath Ab）ELISA試劑盒
人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG（LF/LTF Ab-Ig）ELISA試劑盒
人抗殺菌通透性增高蛋白抗體（BPI-Ab）ELISA試劑盒
人抗腎小球基底膜抗體（GBM）ELISA試劑盒
人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG（MPO-ANCA IgG）ELISA試劑盒
人抗蛋白酶3抗體IgG（PR3 Ab-IgG）ELISA試劑盒
人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA（α-Fodrin IgG/IgA）ELISA試劑盒
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體（ssDNA）ELISA試劑盒
人抗SS-A/Ro抗體ELISA試劑盒
人抗組蛋白（H2A-H2B）-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試劑盒
人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體（dsDNA）ELISA試劑盒
人抗核小體抗體IgG（AnuA-IgG）ELISA試劑盒
人抗硬皮病抗體70（SCL70/topoⅠ）ELISA試劑盒
