小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK）elisa試劑盒使用說明書

Elisa kit規(guī)格：48孔配置/96孔配置

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液：1.5ml×1瓶

酶標(biāo)試劑：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）

【小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK） elisa試劑盒】本試劑僅供研究使用

計(jì)算：

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

試劑盒組成：

封板膜:2片（48）/2片（96）

說明書:1份

密封袋:1個(gè)

標(biāo)準(zhǔn)品：   2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶  2-8℃保存

酶標(biāo)包被板:  1×48     1×96         2-8℃保存

樣品稀釋液: 3ml×1瓶  6 ml×1瓶     2-8℃保存

顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶     2-8℃保存

顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶     2-8℃保存

終止液:     3ml×1瓶 6ml×1瓶     2-8℃保存

濃縮洗滌液:（20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶   2-8℃保存

實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK） 水平。用純化的小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK） 抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK） ，再與HRP標(biāo)記的磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK） 抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK） 呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK） 濃度。

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