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牛血清白蛋白殘留量測定法
點擊次數(shù)：1818 發(fā)布時間：2013-8-20
本法系用酶聯(lián)免疫法測定供試品中牛血清白蛋白（BSA）含量量，以判斷供試品中BSA殘殘留量是否符合規(guī)定的檢測方法。以牛血清白蛋白標準品為標準，采用直線回歸方法計算供試品中牛血清白蛋白含量。
供試品溶液的制備 供試品如為凍干劑型，檢測前應(yīng)按標示量復(fù)溶后震蕩混勻，室溫靜置30分鐘，檢測前應(yīng)再次震蕩混勻。供試品如為液體劑型可直接用于檢測。采用試劑盒提供的供試品稀釋液稀釋供試品，供試品應(yīng)至少進行兩個稀釋度測定，每個稀釋度做雙孔平行測定。測定BSA含量的容器具應(yīng)，防止實驗室中BSA污染。
干擾試驗 制備溶液A（供試品溶液倍比稀釋）、B（供試品溶液和30ng/ml的內(nèi)控標準品等量混合）和C（30ng/ml的內(nèi)控標準品倍比稀釋）。其中，供試品溶液BSA含量高于試劑盒測定范圍中點時，兩倍稀釋后制備溶液A和B。溶液A、B可倍比稀釋測定，溶液C應(yīng)多孔測定，并在試驗間均勻添加。
測定法 按試劑盒說明書進行。試劑盒標準品的吸光度值（A值）、內(nèi)控參考品測定值、標準品線性相關(guān)系數(shù)、雙孔測定吸光度值（A值）均應(yīng)在試劑盒要求范圍內(nèi)，試驗有效。以試劑盒提供的標準品吸光度值（A值）和濃度制定標準曲線，根據(jù)供試品的A值計算供試品中BSA含量，按試劑盒說明書要求判定zui終結(jié)果。
供試品測定時，低稀釋度A值明顯低于高稀釋度A值時可能存在HOOK效應(yīng)或操作失誤，需重試或調(diào)整稀釋倍數(shù)進行檢測。應(yīng)用該試劑盒的供試品應(yīng)進行干擾試驗。干擾試驗中B－A值應(yīng)在C值測定的95％可信區(qū)間內(nèi)。