葉片的Pn受內(nèi)部生理因素如生育期、葉齡、不同部位葉片的影響，還受到環(huán)境因素光、溫、水、CO2、風(fēng)速等的影響。因此，要正確的比較處理間的光合差異，掌握測試方法是非常重要的。

　　1)選擇同樣生育期、相同葉齡、部位的葉片進(jìn)行比較。如光合作用對產(chǎn)量的影響會隨作物生育期不同而不同，因此，據(jù)研究目的首先應(yīng)確定測試的時期。對大量的基因型進(jìn)行測定時，要在做好生育期調(diào)查記載的同時，按生育進(jìn)程分組、分批測定，同時在測試時有目的地選擇一些有代表性的植株，使試材間生育期不同造成的影響在一定程度上降到低。

　　2)測試葉位的選擇。對于品種、處理間的比較，一般選擇對產(chǎn)量影響大、光合速率高的葉片，如小麥、水稻為旗葉，玉米為棒三葉(以穗上葉為，其葉片傾角受穗大小的影響較小)，棉花打頂前為倒5展葉，打頂后為倒一展葉。　　

　　3)測定時期的選擇。根據(jù)不同的研究目的選擇適宜的測定時期非常重要，這樣可避免盲目測定，盡量減少測定次數(shù)而達(dá)到*效果。因此，有必要先了解研究對象作物光合的大致特性。如小麥、玉米、水稻等作物單葉大光合一般出現(xiàn)在葉片展開至展開后的幾天，玉米群體光合zui大值出現(xiàn)在抽雄至吐絲期，棉花出現(xiàn)在盛花至盛鈴期。

　　4)測定時間的選擇。Ｃ3作物如小麥、棉花等大都有明顯的光合"午休"現(xiàn)象，其一日內(nèi)光合zui大值一般出現(xiàn)在上午的9：30一11：30(當(dāng)?shù)貢r，下同)，午休出現(xiàn)在12:00一14:00。因此，對一批材料的測試可在9:30一11:30前后測完，或在9:30一11:30測完重復(fù)，在12:00一14:00測完第二重復(fù)，在15:00一16:30測完第三重復(fù)。玉米等Ｃ4作物不表現(xiàn)"午休"現(xiàn)象，Pnzui高值出現(xiàn)在中午，因此可在11:00一14:00時光強(qiáng)較穩(wěn)定時測定。對大量材料采用輪回測定的方法，并熟練掌握操作技術(shù)，以縮短整個測試過程。并通過調(diào)節(jié)葉室向光方向，使一批樣能在相對統(tǒng)一的光強(qiáng)下完成測定，以避免不同材料由于入射PAR差異而產(chǎn)生誤差。

　　5)供試材料的準(zhǔn)備。(1)在測定之前不要讓供試材料遭受急劇的環(huán)境變化。特別是冬季，溫室栽培植物不要直接搬到屋外低溫環(huán)境條件下。(2)帶入室內(nèi)的供試材料盡可能放在明亮的地方，當(dāng)長時間放在照度低的地方時，由于氣孔*關(guān)閉，測定開始后到出現(xiàn)光合速率大值要花費較多時間。(3)用離體葉測定時，要用刀片在水中剪斷，輸導(dǎo)組織內(nèi)的水不要斷開。(4)選生長健康、代表性強(qiáng)的植株為試材。此外，由于源庫具一定的互作關(guān)系，應(yīng)該在確定庫容量、授精或者輸導(dǎo)過程無異常的情況下進(jìn)行測定。

6)測定呼吸速率時用兩層黑布罩在葉室上，待CO2穩(wěn)定釋放后采樣。