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固定的目的在于保存細胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu),固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。固定劑通過凝固、生成添加化合物等使蛋白質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而使酶失活。固定劑對細胞核細胞外成分發(fā)生物理改變。未固定前活細胞被包裹在不能穿透的膜內(nèi),固定劑能夠破壞這一屏障,使大分子物質(zhì)穿透膜、逸出。選擇固定液對組織染色和免疫組化染色都極其重要,通常將幾種固定劑混合配制成復(fù)合固定液,這樣可以適應(yīng)多種組織、細胞成分的保存,然而目前還沒有一種標準的固定液適用于所有的組織、細胞成分的保存。固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦味酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。
多聚*(4% PFA)主要由多聚甲醛、磷酸鹽、去離子水組成,pH 為7.4,該固定液適合于絕大多數(shù)組織和細胞的固定。4%多聚*是免疫組織化學(xué)和培養(yǎng)細胞固定中zui常用的固定液之一,它能較好的保護組織和細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)以及核酸。
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