中英文名稱:雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）ELISA試劑盒;Chicken N- acetyl beta -D- Glucosaminidase （NAG） ELISA Kit產(chǎn)品性狀:試劑（瓶裝）
科研范疇:elisa試劑盒系列
產(chǎn)品用途:供科研單位,各大高校等用于科研實驗.
產(chǎn)品儲存:2-8°C
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
使用注意事項:試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
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雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）ELISA試劑盒實驗時PCR-SSP分析實驗原理和步驟PCR 序列特異性引物（sequence specific primer,SSP）分析法是使用能夠特異識別特定等位基因的引物通過PCR 擴增檢測序列多態(tài)性的方法，也稱作等位基因特異性引物PCR 法。本實驗是應用PCR-SSP 法檢測MN 基因型。[實驗原理]根據(jù)決定某等位基因的堿基性質(zhì)，設計3´端*個堿基分別與各等位基因的特異性堿基相匹配的序列特異性引物，在PCR 反應過程中，只有引物3´端*個堿基與決定特定等位基因的堿基互補時才能實現(xiàn)DNA 片段的*復制，根據(jù)PCR 產(chǎn)物的有無進行等位基因的分型。
[實驗方法]1.PCR 擴增 PCR 反應體系為20μl（2 個體系，分別為引物1 和引物2），含模板2μl（約50ng），引物各1.5μl，dNTP1.6μl（0.4mM），10×Buffer 緩沖液2μl，Taq 酶1.0U，加雙蒸水至20.0μl；PCR 反應條件為94℃4min，94℃1.5min/52℃2.0min/72℃2.0min，30 個循環(huán)。2.PCR 擴增產(chǎn)物的檢測 取PCR 擴增產(chǎn)物2μl，6%聚丙烯酰胺凝膠電泳（T=6%，C=3.3%，凝膠規(guī)格為82mm×64mm×0.75mm）。電極緩沖液為1×TBE。將加有1/5 體積上樣緩沖液的酶切產(chǎn)物電泳，220 v 電壓，電泳2－3h。銀染顯色[結(jié)果判定]根據(jù)電泳譜帶的有無判定等位基因型別，僅有1 個體系檢測到譜帶者為相應特異性引物對應型（M 或N），2 個體系均檢測到譜帶者為MN 型。[實驗討論]1.注意事項 ①如引物結(jié)合序列存在堿基變異可能無擴增產(chǎn)物，導致錯誤判型；②在對照樣品分型準確的基礎上才能判定結(jié)果。2.方法評價 該方法操作簡單，引物設計與實驗的復性條件要求較高。
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