人抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）elisa試劑盒使用說明書

時間：2012-12-3閱讀：382

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Elisa kit規(guī)格：48孔配置/96孔配置

標準品稀釋液：1.5ml×1瓶

酶標試劑：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）

【人抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）elisa試劑盒】本試劑僅供研究使用

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

實驗原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）水平。用純化的人抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b），再與HRP標記的抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）濃度。

目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）的含量。

【人抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）elisa試劑盒】注意事項：

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%

檢測范圍：

0.2IU/L - 6IU/L

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