丘腦分泌素受體抗體(食欲素受體)的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
小鼠組織纖溶酶原激活劑(mouse t-PA)
小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(mouse Transferrin)
小鼠胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(mouse TSLP)
小鼠血栓烷B2(mouse TXB2)
小鼠可溶性腫瘤壞死因子-a受體(mouse sTNF-aR)
小鼠組織多肽抗原(mouse TPA)
小鼠血小板生成素(mouse TPO)
小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(mouse TRAIL/APO 2L)
小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(mouse TM)
小鼠血管細(xì)胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)
小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(mouse VEGF)
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(mouse VEGF-B)
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(mouse VEGF-C)
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(mouse VEGF-D)
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(mouse VEGF-R1)
小鼠血管活性腸肽(mouse VIP)
小鼠血管性血友病因子(mouse VWF)
小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-2(mouse VEGF R2)
小鼠軟骨糖蛋白39(mouse YKL-40)