犬肌鈣蛋白Ielisa檢測試劑盒試劑配制:
1、犬肌鈣蛋白Ielisa檢測試劑盒說明書酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
當鈣離子濃度升高到一定程度時, TnC與鈣離子結合,導致其構型發(fā)生改變,并將此效應傳遞到肌鈣蛋白,TnI的構型隨之發(fā)生改變,與肌動-原肌球蛋白脫離,抑制作用被解除,橫橋ATPase被激活,細肌絲發(fā)生滑動,肌肉表現出收縮性。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑(ELISA)。預先包被的犬cTnI抗體為多克隆犬cTnI抗體。檢測相犬cTnI抗體也為多克隆犬cTnI抗體,經生物(biotin)標記。樣品和生物標記犬cTnI抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。