柱式土壤DNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn) 本產(chǎn)品是整合天澤基因土壤DNAOUT（CAT：6070）和柱式腐殖酸清除劑（CAT：6080）兩個(gè)產(chǎn)品而得的柱式升級(jí)產(chǎn)品。它結(jié)合了兩者的優(yōu)點(diǎn)，專門用于從各種土壤樣品和河海沉積物中提取高質(zhì)量的DNA的試劑。跟土壤DNAOUT相比它具有下列特點(diǎn)：
. 去污染效果更好，得到的DNA可以直接作為PCR模板或酶切，不需要再進(jìn)行去腐殖酸處理。
2. 操作過(guò)程更加簡(jiǎn)單快速，整個(gè)操作只需要0多分鐘，擴(kuò)容性好。
3. 產(chǎn)量高，每克土壤一般可以提取到5-50 ug DNA，片段長(zhǎng)度在20-50 Kb，OD260/280一般都在.8以上。
4. 適合于各種土壤（包括河海沉積物）。
規(guī)格及成分 成 份 50次包裝
溶液A 25 mL
溶液B 25 mL
溶液C 40 mL
離心吸附柱 50套
通用洗柱液 50 mL
通用洗脫液 0 mL
使用手冊(cè) 份

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸及保存，保存期為一年。
自備試劑 氯仿。
使用方法 . 65℃預(yù)熱溶液A，待其沉淀溶化后充分混勻，取0.5 mL加入到.5 mL塑料離心管中并放置于65℃待用。
2. 稱取0.-0.3 g的土壤，加入到含預(yù)熱溶液A的離心管中，震蕩器上劇烈震蕩5-0分鐘。如果是擴(kuò)量操作，可以使用更多土壤和較大離心管。也可以將同一種土壤在較大離心管中震蕩處理，然后再分到.5 mL離心管中。注意:不論使用大的還是小的離心管，一定要讓管底的土壤震蕩起來(lái)。
3. 將離心管置于65℃水浴中保溫至少5分鐘。
4. 2000-5000 g室溫離心3分鐘，將上清轉(zhuǎn)移到一新離心管中（上清液一般呈淡黃色或深棕色，實(shí)際顏色取決于腐殖酸的含量，上清液的體積一般為300-400 µL）。
5. 在上清液中加入等體積的溶液B，上下顛倒30秒充分混勻，溶液將呈白色或淡黃色混濁狀。
6. 將離心管冰浴至少5分鐘。
7. 2000-5000 g室溫離心3分鐘，轉(zhuǎn)移上清到新的.5 mL離心管中，上清液顏色將比第4步得到的上清的顏色稍淡，體積在0.7 mL左右。
注意：下面第8-第9步的氯仿抽提操作可以省略，直接進(jìn)入第0步，但DNA的產(chǎn)量會(huì)低50%左右，OD260/280在.7-.8。如果直接進(jìn)入第0步，則轉(zhuǎn)移的溶液體積不要超過(guò)0.6 mL，否則沒(méi)有空間加溶液C。
8. 加入0.2 mL的氯仿（自備），震蕩器上充分振蕩30秒混勻。注意:一定要讓管底的溶液震蕩起來(lái)。
9. 2000-5000 g室溫離心3分鐘，小心轉(zhuǎn)移上清到新離心管中。說(shuō)明：離心后兩相交界面將有白色膜狀物，其中有機(jī)相部分顏色較深，一般呈淡棕色。上清的顏色取決于土壤中腐殖酸的含量。將上清轉(zhuǎn)移到新的.5 mL離心管時(shí)，不要超過(guò)0.6 mL，否則沒(méi)有空間加溶液C。如果有多余的可以棄之不用。
0. 加入.5倍體積的溶液C，上下顛倒30秒混勻。
. 分兩次上柱（即先轉(zhuǎn)移一半的混合液到離心吸附柱中，2000-5000 g室溫離心半分鐘，棄穿透液，然后再將剩下的混合液到離心吸附柱中，2000-5000 g室溫離心半分鐘，棄穿透液）。
2. 加0.7 mL通用洗柱液到離心吸附柱中，2000-5000 g室溫離心半分鐘，棄穿透液。
3. 如果有必要，可以再加0.3 mL通用洗柱液到離心吸附柱中，2000-5000 g室溫離心半分鐘，棄穿透液。增加一步洗滌能使zui后得到的DNA的純度稍有提高，但產(chǎn)量稍微有所降低。
4. 2000-5000 g室溫再離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的通用洗柱液會(huì)污染DNA。
5. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一新的.5 mL塑料離心管中，加入50-00 uL 通用洗脫液。
6. 室溫放置離心吸附柱-2分鐘。
7. 2000-5000 g室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為DNA樣品，可以立即使用或存放于冰箱待用。