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人黏著斑激酶(FAK)elisa試劑盒?操作步驟

時間:2021/9/22閱讀:427
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人黏著斑激酶(FAK)elisa試劑盒操作步驟:

. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔0孔,在di一、第二孔中分別加標準品00μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取00μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘.

0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘。

維拉帕米 雜質(zhì)I(V00008

:用于峰鑒別試驗(Y0000625

(Y000056

(T500000

托烷司瓊雜質(zhì)B: -吲哚甲酸(Y000068

托品醇(T2580 00

(T707000

托滅酸(Y00005

:用于系統(tǒng)適用性試驗(Y000062

(Y00006

(T2580000

天然生育酚:用于峰鑒別試驗(Y0000 8 

(T70000

雜質(zhì)B(T7000

雜質(zhì)A(Y0000899

替諾昔康(T000800

(Y000068

替可克肽(T0550000

鈉;羧噻吩鈉(Y000065

雜質(zhì)A(T2000

替勃龍:用于系統(tǒng)適用性試驗(Y0000668

替勃龍 - 對照譜圖(Y000078

特拉唑嗪雜質(zhì)A(Y0000622

特拉唑嗪 雜質(zhì)N(Y000062

特拉唑嗪 雜質(zhì)L(Y000062 

特拉唑嗪 雜質(zhì)E(Y0000665

特拉唑嗪 :用于系統(tǒng)適用性試驗(Y0000666

特非那丁(T007000


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