谷研試劑-鴨氨基酸真利用率的有效性評(píng)定

.TAAA測(cè)定方法及盲腸切除的必要性

氨基酸利用率測(cè)定的常用方法是TME法，國(guó)內(nèi)外很多研究者(王康寧，996；黃世儀，997；江慶娣，998；樊紅平，2006；Ragland et a．，999；Hong et a．，200)采用此方法進(jìn)行雞(鴨)氨基酸利用率的研究。氨基酸有效性的測(cè)定過(guò)程與飼料代謝能相同。在動(dòng)物腸道回腸末端未被消化和吸收的飼料中氨基酸進(jìn)入大腸時(shí)微生物會(huì)對(duì)其進(jìn)行降解。由于盲腸是家禽腸道內(nèi)微生物增殖的主要場(chǎng)所，盲腸內(nèi)pH適宜(6．5—7．5)，是厭氣和液態(tài)的環(huán)境，并且每6—8h就排空次(Jayne．williams et a．，974)。盲腸微生物對(duì)外源含氮物質(zhì)的利用比較復(fù)雜，其對(duì)食糜中蛋白質(zhì)、氨基酸的降解或再合成的速率受飼料、年齡、身體狀況、氣溫(Zuprizal et a．，993)、微生物群系變化(Parsons et a．，982)等多種因素的影響，因此對(duì)各種氨基酸的降解和合成也可能不是一成不變的。為克服微生物的這種作用，在評(píng)定氨基酸真利用率上有必要采用去盲腸的動(dòng)物進(jìn)行測(cè)定。研究還發(fā)現(xiàn)，可消化性高和質(zhì)量好的蛋白質(zhì)受盲腸微生物的影響較小，而消化性低質(zhì)量差的蛋白質(zhì)受盲腸微生物影響較大(Nesheinet a．，967；田河山等，2000)，采用去盲腸雞測(cè)定飼料氨基酸消化率比未切除盲腸雞的可加性要好。

2.內(nèi)源氨基酸損失的測(cè)定

表觀氨基酸利用率由于沒(méi)有扣除內(nèi)源氨基酸損失不能在不同試驗(yàn)不同動(dòng)物和不同飼料之間進(jìn)行比較，而氨基酸真利用率能縮小這種差異，并提高飼料氨基酸利用率的可加性(黎觀紅，2002)。內(nèi)源氨基酸是來(lái)自消化道分泌的酶、脫落的腸黏上皮膜細(xì)胞和黏液及后腸微生物。準(zhǔn)確測(cè)定內(nèi)源氨基酸的意義在于它是研究飼料氨基酸真消化率*的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)：與表觀可消化氨基酸相比，以飼料真可消化氨基酸為基礎(chǔ)配制動(dòng)物飼糧，能zui大的使供給與需求之間達(dá)到相一致。研究表明，內(nèi)源氨基酸由基礎(chǔ)內(nèi)源損失和日糧引起的特異性內(nèi)源損失組成(Jansman，2002)，基礎(chǔ)內(nèi)源損失除了動(dòng)物攝取DM引起分泌氨基酸外，還包括引饑餓狀態(tài)下分泌到胃腸道中的氨基酸，日糧引起的特異性氨基酸損失可能是同日糧中的纖維和抗?fàn)I養(yǎng)因子有關(guān)。測(cè)定內(nèi)源氨基酸排泄量的方法有多種，如絕食法、無(wú)氮日糧法、回歸法、酶解蛋白法和同位素示蹤法等(王康寧，2004)，其中無(wú)氮日糧法和絕食法是zui常用的方法(岳良泉和王康寧，996；姚軍虎等，2000；黎觀紅等，2002；翟少偉和曹平華，2003；Ragland et a．，997；King et a．，997)，國(guó)外在測(cè)定豬內(nèi)源損失時(shí)，采用zui多的也是無(wú)氮日糧法(Stein et a．，2005)。

研究表明，絕食法和無(wú)氮日糧法測(cè)定內(nèi)源氨基酸排泄量存在差異，原因可能是絕食法缺乏食物對(duì)胃粘膜的磨損，加之內(nèi)分泌重吸收增加，因而低估了內(nèi)源氨基酸的排泄量。Parson等(982)指出，試雞采食無(wú)氮日糧后內(nèi)源氨基酸損失加大，并隨纖維素含量的增加而增加，這是由于無(wú)氮日糧中的纖維素可促使粘膜細(xì)胞脫落引起(Muzataret a．，980；Beams et a．，98)；而且同無(wú)氮日糧提供的碳水化合物一起促進(jìn)微生物氨基酸的合成。而絕食法缺乏這些營(yíng)養(yǎng)因素的作用，無(wú)氮日糧法也更接近動(dòng)物采食飼料時(shí)內(nèi)源氨基酸排泄量的實(shí)際情況，其缺點(diǎn)是動(dòng)物采食無(wú)氮日糧后，腸道分泌的蛋白質(zhì)消化酶會(huì)減少，內(nèi)源氨基酸的總量減少(Parsons et a．，983)。

回歸法測(cè)定不足是假定內(nèi)源氨基酸的排泄量為恒定值，而實(shí)際測(cè)定的結(jié)果有很大差異(王康寧，2004)。酶解酪蛋白法雖然可以在動(dòng)物處于正常生理狀態(tài)下測(cè)定所有的內(nèi)源氨基酸排泄量，不足之處是通過(guò)分子量的大小仍不能*區(qū)分內(nèi)外源組分，內(nèi)源物中仍含有相當(dāng)部分的氨基酸、小肽及氨等小分子物質(zhì)(Hendriks et a．，2002)。同位素示蹤法中標(biāo)記日糧，5N標(biāo)記的飼料非常昂貴而且不易看到，標(biāo)記動(dòng)物通過(guò)標(biāo)記5N-的轉(zhuǎn)氨基作用標(biāo)記其它氨基酸，進(jìn)而測(cè)定其它其它氨基酸的內(nèi)源排泄量，由于氨基酸的循環(huán)非常迅速，血清中三氯乙酸(TCA)中可溶部分5N豐度的穩(wěn)定狀態(tài)受到質(zhì)疑(Moughan et a．，992)。可見(jiàn)內(nèi)源氨基酸測(cè)定方法中無(wú)氮日糧法具有易操作、重復(fù)性好、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，盡管存在一些缺點(diǎn)，其還是被作為常用的內(nèi)源氨基酸測(cè)定方法。

研究表明，在評(píng)價(jià)一個(gè)測(cè)定飼料生物學(xué)效價(jià)的方法時(shí)，首先應(yīng)該考慮到所測(cè)結(jié)果能夠反映客觀實(shí)際程度及可加性，另外，可重復(fù)性與可操作性也很重要，試驗(yàn)造作簡(jiǎn)便易行，費(fèi)用低廉。首先，正常生理問(wèn)題，只有動(dòng)物處于接近生理狀態(tài)的情況下，所測(cè)定的氨基酸消化率才有實(shí)際意義。其次，能否取得足夠量的有代表性的樣本，是關(guān)系到氨基酸消化率測(cè)值可重復(fù)性的關(guān)鍵。